Développement et validation d’une méthode de dosage de gélules pédiatriques de lévofloxacine hémihydrate

Introduction La levofloxacine est indiquee dans la prise en charge de la tuberculose multiresistante chez l’enfant a la posologie de 15 mg/kg/jour en une prise unique. En l’absence de specialites adaptees a l’enfant, des gelules de levofloxacine dosees entre 50 et 300 mg sont realisees au preparatoire. L’objectif de ce travail est de developper et de valider une methode de dosage de ces preparations, afin de pouvoir realiser en routine un essai de teneur. Materiels et methode Les preparations sont composees de levofloxacine hemihydrate et de cellulose microcristalline dans des gelules de gelatine de couleur ivoire ou verte et blanche. Le dosage est realise par chromatographie liquide haute performance (HPLC) en polarite de phase inversee avec une colonne RP18 endcapped (LiChrospher 100 ® 5 μm, 125 × 4,6 mm) thermostatee a 30°C. La phase mobile est composee de tampon phosphate a pH 3 (20 mm K2HPO4 + 1 mL de triethylamine, ajuste avec de l’acide orthophosphorique) et de l’acetonitrile (84:16 v/v) a 1,5 mL/min. Le volume d’injection est de 20 μL et le temps d’analyse est de 6 min. La detection est realisee avec un spectrophotometre a barrettes de diodes, dans l’UV a 294 nm. La methode est validee selon les recommandations des ICH : deux gammes d’etalonnage composees de cinq points (de 30 a 70 mg/L), avec et sans excipients, ainsi que six controles qualites a 50 mg/L sont realises a J1, J2 et J3. Chaque point de gamme est prepare a partir d’une pesee independante. Ont ete evaluees la linearite, la specificite, la fidelite et l’exactitude. Resultats et discussion Le temps de retention est de 3,6 ± 0,4 min. L’analyse des variances montre une linearite dans le domaine 30–70 mg/L avec un coefficient de correlation R2 = 0,988. Les coefficients de variations de la repetabilite (2,33 %) et de la fidelite intermediaire (2,76 %) sont inferieurs a 5 %, la methode est fidele. L’intervalle de confiance du taux de recouvrement est [98,93–101,13], la methode est exacte. La comparaison statistique des deux gammes d’etalonnage (pentes et ordonnees a l’origine), avec ou sans excipients, selon le test- t de Student (α = 5 %) ne montre pas de differences significatives, la methode est specifique. Conclusion La methode de dosage est lineaire, specifique, fidele et exacte selon les recommandations des ICH. Elle va permettre de realiser des essais de teneur des preparations de levofloxacine faites dans le cadre de la prise en charge de la tuberculose multiresistante chez le patient pediatrique. La methode developpee pourra etre utilisee pour mettre au point et determiner la stabilite d’une nouvelle forme galenique de levofloxacine, une forme orale liquide, facilitant l’adaptation posologique.