一种重组β-内酰胺酶的原核表达，纯化及其活性检测

目的：利用原核表达系统诱导表达一种可以用于肿瘤生物治疗ADEPT（单抗导向酶活化前药）的重组蛋白RGD4CβL，并对该蛋白进行纯化以及活性检测。方法：对合成的DNA序列进行测序，将重组载体pColdII-RGD4CβL转化人大肠杆菌E.coli BL（DE3），在大肠杆菌细胞中诱导表达目的蛋白，用His标签纯化树脂Ni-NTA纯化目的蛋白，以流式细胞术（FCM）检测纯化所得蛋白的活性。结果：合成的DNA全长为1125bp，其在E.coli BL（DE3）中经IPTG诱导后表达出相对分子质量（M）约为42000的目的蛋白，经纯化后获得了产率和纯度均很高的重组蛋白RGD4CβL，流式细胞检测证明该蛋白具有很好的肿瘤细胞靶向性。结论：成功地对重组蛋白RGD4CβL进行了诱导表达，得到的纯化蛋白具有较好的肿瘤细胞靶向性，该重组蛋白将可能成为一种免疫原性更低的新型双功能蛋白用于ADEPT。