腺苷钴胺素合成酶基因cobs的克隆及其在产1,3-丙二醇菌中的应用

2010 
甘油脱水酶是催化由甘油到1,3-丙二醇过程中的关键酶,它需要在辅酶B12存在的情况下才能有效的进行催化;而在此催化过程中甘油脱水酶会出现失活现象,研究表明辅酶B12可以有效的促使甘油脱水酶复活。因此,辅酶B12在由甘油生物催化生产1,3-丙二醇过程中起到非常重要的作用。本研究利用PCR扩增技术,从EscherichiacoliK-12菌株中扩增出产VB12关键酶-腺苷钴胺素合成酶基因cobs,其序列与NCBI上已经公布的序列比对,同源性为99.6%,将基因cobs与产1,3-丙二醇关键酶基因dhaB、yqhD在Klebsiellapneumoniae中共表达,发酵结果显示重组菌所需额外添加的VB12由原始菌株的0.01g/L下降到0.004g/L。
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