苯并[ a ]芘对人支气管上皮细胞 CYP1A1 、 GSTP1 和 GSTM1 DNA甲基化水平和mRNA表达的影响

[目的] 探讨苯并[ a ]芘（BaP）对人支气管上皮（16HBE）细胞中 CYP1A1 、 GSTP1 和 GSTM1 启动子区DNA甲基化水平和mRNA表达的影响，为BaP毒理学机制的研究提供科学基础。 [方法] 体外培养16HBE细胞，取对数生长期的同一批次细胞，随机分为4组，包括1个溶剂对照组和3个BaP处理组，分别用二甲基亚砜（DMSO）及1、2、5 mmol/L BaP处理24 h，于倒置显微镜下观察细胞的形态学改变。采用CCK-8试剂盒测定细胞增殖能力，甲基化特异性PCR法检测 CYP1A1 、 GSTP1 和 GSTM1 启动子区DNA甲基化水平，实时定量PCR技术检测 CYP1A1 、 GSTP1 和 GSTM1 mRNA表达的改变。采用SPSS 22.0软件的单因素方差分析进行比较，LSD法进行多组间的两两比较。 [结果] 与溶剂对照组相比，1、2、5 mmol/L BaP处理组新生细胞数目明显增多，细胞增殖率增高，分别为（100.00±0.47）%、（125.22±0.72）%、（122.92±1.47）%、（128.44±5.97）%（ P ＜0.05）。3个BaP组 CYP1A1 启动子区甲基化水平分别为8.451±1.234、8.532±0.728、11.064±0.423，低于溶剂对照组（13.917±1.094）（ P ＜0.05）。3个BaP处理组 GSTP1 启动子区甲基化水平分别为4.276±0.839、3.691±0.748、2.121±0.336，也低于溶剂对照组（10.860±1.129）（ P ＜0.05）。 GSTM1 启动子区甲基化水平分别为34.693±6.603、48.407±7.824、49.803±2.516；其中，1 mmol/L BaP组低于溶剂对照组（40.062±7.746），2、5 mmol/L BaP组高于溶剂对照组（均 P ＜0.05）。3个BaP组 CYP1A1 mRNA表达水平分别为0.009±0.001、0.009±0.001、0.017±0.003，低于溶剂对照组（1.067±0.064）（ P ＜0.05）； GSTP1 mRNA和 GSTM1 mRNA的表达水平分别为（0.179±0.074、0.167±0.048、0.143±0.029）和（0.547±0.181、0.518±0.141、0.297±0.044），均低于溶剂对照组（0.829±0.116、0.975±0.183）（ P ＜0.05）。 [结论] BaP对16HBE的毒作用机制可能与其细胞增殖能力增强及 CYP1A1 和 GSTP1 启动子区DNA甲基化水平降低， CYP1A1 、 GSTP1 、 GSTM1 mRNA表达降低有关。