Využití mikrofluidiky při charakterizaci substrátové specificity halogenalkandehalogenas

Mikrofluidika je rychle se rozvijejici obor, který zkouma a využiva manipulaci s malými objemy tekutin, konkretně s mikrolitry až femtolitry. V poslednich patnacti letech mikrofluidika nachazi využiti v biochemii a přibuzných přirodnich a biomedicinských vědach. Mezi hlavni přinosy, ktere mikrofluidika v teto oblasti nabizi, patři výrazne sniženi spotřeby vzorků a tim i sniženi provoznich nakladů, zrychleni analýzy, vyssi výkonnost a efektivnost analýz a vysoka kvalita výstupnich dat. Mikrofluidni technologie se uplatňuji např. u DNA sekvencovani nove generace, digitalnich variant polymerazove řetězove reakce, nebo pro krystalizaci proteinů. Tato bakalařska prace se zaměřuje na využiti mikrofluidiky pro kombinatoricke studium specificity enzymatických reakci. Teoreticke kapitoly přibližuji dosavadni znalosti z mikrofluidiky důležite pro porozuměni experimentům a strucně charakterizuji skupinu studovaných enzymů – halogenalkandehalogenasy. V experimentalnich kapitolach je představena nova mikrofluidni platforma využitelna pro charakterizaci substratove specificity halogenalkandehalogenas. V praci jsou popsany experimenty směřujici k optimalizaci teto platformy pro tuto specifickou aplikaci a nový mikrofluidni přistup je srovnan se dvěma běžnými metodami měřeni enzymaticke aktivity halogenalkandehalogenas: (i) s klasickým testem aktivity v Erlenmayerových baňkach a (ii) s verzi integrovanou do mikrotitracnich desticek.