Papel de hemo oxigensa-1 en la artritis inducida por transferencia de suero K/BxN. Caracterización del modelo experimental

La Artritis Reumatoide (AR) es una enfermedad sistemica, cronica y de caracter autoinmune que produce dano articular en los pacientes. El estudio de la patogenia y del tratamiento de la AR se desarrolla en gran medida sobre modelos animales de artritis experimental. En la actualidad existen varios modelos de artritis en raton ampliamente utilizados, pero poseen algunas limitaciones. En la primera parte de esta tesis, se ha realizado un estudio para adaptar el modelo de artritis por transferencia de suero K/BxN a un modelo cronificado. Esto nos permite estudiar las caracteristicas fisiopatologicas de este proceso en su fase mas tardia en ratones wild type y en ratones modificados geneticamente, asi como analizar distintas dianas terapeuticas para el tratamiento de la enfermedad. La adaptacion de este modelo se realizo ampliando el modelo inicial, realizando cinco inmunizaciones periodicas. Con esto conseguimos mantener elevados los mediadores inflamatorios propios de dicha enfermedad y los signos caracteristicos del proceso artritico mimetizando la patogenia de la AR. En la segunda parte de la tesis se estudia la participacion de la enzima hemo oxigenasa-1 (HO-1) en la regulacion de la AR. Esta enzima HO-1 posee propiedades citoprotectoras, antioxidantes y antiinflamatorias. Por ello, decidimos estudiar el papel de HO-1 en la fase efectora de la artritis experimental. Para ello, trabajamos con el modelo clasico de artritis experimental por transferencia de suero K/BxN. Los animales utilizados fueron ratones Knockout (KO) para la enzima HO-1 (HO-1-/-) y ratones heterocigoticos (HO-1+/-). En contra de la idea inicial, los ratones que mostraban mayor severidad en la patogenia de la artritis a nivel macroscopico fueron los ratones heterocigoticos y el estudio histologico confirmo estos datos. La heterocigosis provoco una intensa respuesta inflamatoria articular que estaria relacionada con un aumento de los niveles de CXCL-1 y de la migracion leucocitaria, mientras que la homocigosis determino una mayor respuesta inflamatoria sistemica. Continuamos los estudios sobre la actividad de esta enzima en celulas mieloides. Para ello utilizamos ratones KO condicionales (HO-1KO-M) incapaces de expresar HO-1 pero unicamente en las celulas procedentes de la linea mieloide. Realizamos un primer estudio de la implicacion de HO-1 en el proceso inflamatorio mediado por dichas celulas, trabajando con un modelo sencillo de inflamacion aguda conocido como “bolsa de aire en raton”. En los resultados obtenidos, pudimos comprobar que los ratones HO-1KO-M mostraban niveles mas elevados de migracion leucocitaria y de los mediadores inflamatorios principales (IL-1β, TNFα, MMP-3, PGE2). Una vez comprobada la implicacion de HO-1 mieloide en la regulacion de un proceso inflamatorio agudo, estudiamos la influencia de esta delecion en la linea mieloide en el modelo de artritis por transferencia de suero K/BxN, donde la regulacion de la inflamacion depende de la influencia de una gran variedad de factores. Con este objetivo, desarrollamos el modelo artritico K/BxN en los ratones HO-1KO-M. El resultado fue una artritis caracterizada por un aumento en la osteoclastogenesis y en la formacion de osteofitos en los ratones HO-1KO-M.