Omi／HtrA2对前列腺癌细胞株PED／PEA-15表达及PC-3细胞凋亡的影响

背景与目的：促、抑凋亡因子间的相互作用与肿瘤的发生、发展密切相关。Omi／HtrA2是新近发现的一种凋亡调节因子，PED／PEA—15是一种广泛表达的抗凋亡蛋白。本研究旨在探讨Omi／HtrA2对PED／PEA—15表达和前列腺癌细胞PC-3凋亡的影响。方法：构建Omi／HtrA2的表达载体和siRNA载体。并用脂质体法分别将两载体转染至PC-3细胞中，Westernblot和ELISA法检测Omi／HtrA2对PED／PEA—15表达和细胞凋亡的影响；Caspase-8检测试剂盒检测PED／PEA-15对Caspase-8活性的影响；Westernblot、RT—PCR法检测Omi／HtrA2特异siRNA序列对其转录、翻译的影响，流式细胞仪检测siRNA导致Omi／HtrA2基因沉默后PC一3细胞凋亡的变化。结果：酶切和DNA测序证实Omi／HtrA2的表达载体和siRNA载体构建成功。通过转染Omi／HtrA2表达载体高表达Omi／HtrA2可抑制PED／PEA-15表达，并增加肿瘤细胞的凋亡率；抑制PED／PEA—15的表达可提高Caspase-8活性。siRNA沉默Omi／HtrA2基凶后PC-3细胞对顺铂的敏感性降低。结论：Omi／HtrA2可通过抑制抗凋亡蛋白PED／PEA—15表达而在PC-3细胞凋亡中发挥重要作用。