Das Corpus luteum – ein zelluläres Modellsystem

Fragestellung: Das wichtigste morphologische Kennzeichen des Corpus Luteum (CL) Wachstums ist eine ausgepragte Vaskularisation der zuvor avaskularen Granulosazellschicht (GC) durch einwandernde Endothelzellen (EC). Bei Eintritt einer Schwangerschaft wird dann unter dem Einfluss von hCG das CL in den ersten Schwangerschaftswochen zu einer Progesteron produzierenden Druse umgewandelt. Welche Faktoren an der Umwandlung und der exakten zeitlichen und raumlichen Regulation der CL Entwicklung beteiligt sind, ist allerdings noch unvollstandig geklart. Methodik: Um die Vorgange wahrend der Corpus luteum Entwicklung besser verstehen zu konnen, haben wir ein spheroidales dreidimensionales Zellkultursystem entwickelt, das die fundamentalen Funktionen des CL, namlich Progesteron Produktion und gonadotrop gesteuertes Wachstum und Angiogenese, sowohl qualitativ als auch quantitativ darstellbar macht. In diesen Spheroiden umschliesen die Endothelzellen einen Hohlraum und werden selbst wiederum von Granulosazellen ummantelt. Unter Stimulation bilden die Spheroide zellulare Sprossen aus, deren Anzahl und Lange von den gewahlten Stimulationsbedingungen abhangig ist. Mithilfe eines Computerprogramms lasst sich die kummulative Sprossungslange der einzelnen Spheroide bestimmen und ermoglicht valide Aussagen uber die Wirksamkeit des untersuchten Stimulus auf das Spheroid. Ergebnisse:Ahnlich wie auch in der in vivo Situation lasst sich mithilfe dieses Assays die unterschiedliche Wirkung von hCG und LH auf das zellulare Wachstum von CL Zellen diskriminieren. Hierbei spielt die differentielle Aktivierung von PKA und PKC abhangigen intrazellularer Signalkaskaden die Schlusselrolle zur Erklarung der unterschiedlichen Hormonwirkung. Daruberhinaus lasst sich auch die angiogene Potenz verschiedener Angiogenesefaktoren wie VEGF-A und Ang-1 und Ang 2 darstellen und quantifizieren. Schlussfolgerung: Das von uns entwickelte Modell kann ein wichtiges Hilfsmittel sein, um die zellularen Vorgange wahrend der CL Entwicklung besser zu verstehen. Es ermoglicht dabei insbesondere auch zu einem besseren Verstandnis der hormonabhangigen Lutealphaseninsuffizienz beizutragen.