乳酸杆菌的分离、鉴定及对肠上皮细胞分泌IL-8调节作用的研究

目的探讨分离益生菌及对益生菌进行鉴定的方法,将益生菌与肠上皮细胞共培养,进一步探讨益生菌对炎症状态时肠上皮细胞分泌促炎细胞因子的调节作用.方法对自正常儿童大便分离出的乳酸杆菌进行表型特征鉴定,并进行培养.将乳酸杆菌(1×108 CFU/ml)与HT29细胞共培养,1h后加入TNF-α(10 ng/ml).3 h后,收集上清,ELISA法测IL-8;提取细胞RNA,经RT-PCR检测IL-8的表达.结果经表型特征鉴定,分离出的乳酸杆菌为保加利亚乳酸杆菌.与保加利亚乳酸杆共培养后,HT29细胞IL-8 mRNA表达降低,培养液IL-8浓度也明显降低.结论自正常儿童大便分离益生菌是获得益生菌有效的方法;保加利亚乳酸杆菌能明显抑制炎症状态时肠上皮细胞分泌IL-8.