Avaliação da eficácia na extração de DNA de Schinus molle L. com adição de diferentes concentrações de 2-B-mercaptoetanol.

Schinus molle L. (Anacardiaceae) e uma especie de arvore perene, dioica, com ocorrencia natural no Bioma Pampa, muito utilizada na arborizacao de ruas e parques. Possui grande importância ecologica por ser crucial na criacao de condicoes ambientais para estabelecimento florestal, alem de muito utilizada na industria farmaceutica por seus oleos essenciais. Estudos geneticos vem sendo desenvolvidos para populacoes naturais de S. molle , porem em funcao dos diversos compostos secundarios presentes nessa especie a extracao de seu DNA apresenta baixa qualidade. O 2-β-mercaptoetanol e um agente redutor que protege o DNA contra a atividade de enzimas, tais como peroxidases e polifenolodidases, desnaturando-as, deixando o DNA final o mais puro. Este trabalho teve como objetivo testar a adicao de diferentes concentracoes 2-β-mercaptoetanol no protocolo de extracao de DNA e avaliar sua eficiencia em Schinus molle . Para esse trabalho foi identificada e coletada uma amostra foliar em populacao natural de S. molle no municipio de Sao Gabriel/RS. Essa amostra foi dividida em 5 (cinco) testes, sendo o controle com kit de extracao de DNA  (DNeasy Plant Mini Kit) da marca Qiagen seguindo o protocolo do fabricante. Esse kit foi utilizado como controle em virtude de seus filtros fisicos e quimicos que ajudam na remocao das impurezas do DNA, servindo como um comparativo de qualidade. Para as demais amostras, a extracao de DNA foi realizada com protocolo CTAB 2% (Cationic hexadecyl trimethyl ammonium bromide) com adicao de diferentes concentracoes de 2-β-mercaptoetanol (0%, 1%, 3% e 5%). O DNA extraido foi quantificado por espectrofotometria utilizando o equipamento Nanoview® e sua qualidade foi aferida por eletroforese em gel de agarose 0,8%. Apos as analises no espectrofotometro, a maior quantidade de DNA de S. molle foi registrada no protocolo de extracao CTAB 2% com 0% de 2-β-mercaptoetanol, com um total de 46 ng de DNA. Os resultados nos mostraram que na presenca do 2-β-mercaptoetanol, foram obtidas quantidades inferiores a 10 ng de DNA. Com o kit Qiagen as quantidades de DNA ficaram por volta de 5 ng, que apesar do baixo valor apresentou melhor grau de pureza. A eletroforese em gel de agarose corroborou os dados de pureza obtidos mostrando um DNA mais integro sem a adicao do 2-β-mercaptoetanol. Os resultados alcancados mostraram que o protocolo mais adequado para a extracao do DNA de Schinus molle foi o CTAB 2%, sem a presenca do 2-β-mercaptoetanol, que interferiu desfavoravelmente na quantidade final desse DNA. Esse trabalho servira de base para futuras analises em diversidade genetica populacional de S. molle .