Mise au point de modèles cellulaires pour l'étude des effets toxicologiques infracliniques de thérapeutiques utilisées en ophtalmologie

Les etudes recentes en toxicologie oculaire se sont beaucoup interessees aux effets toxiques des conservateurs contenus dans les preparations ophtalmologiques, en particulier du chlorure de benzalkonium. Or, le programme REACH avec la limitation de l’utilisation d’animaux de laboratoire en toxicologie impose de revoir les outils classiques d’evaluation de la toxicite oculaire et de developper de nouvelles approches. En outre, les principales etudes in vitro realisees jusqu’a pre��sent utilisaient comme modele la lignee epitheliale conjonctivale de Chang presentant l’inconvenient d’un melange avec des cellules tumorales HeLa. Nous avons donc valide l’utilisation d’une nouvelle lignee qui ne presente pas ce risque, la lignee IOBA-NHC, puis illustre l’utilisation de cette lignee par l’etude des effets d’un nouveau collyre sans conservateur de la famille des derives des prostaglandines, le tafluprost en unidoses. Cependant, les lignees conjonctivales sont un modele unicellulaire en monocouche qui ne reproduit pas les conditions structurelles de l’in vivo, et qui ne permet pas d’evaluer les interactions faisant intervenir d’autres types cellulaires comme les mucocytes et surtout les cellules inflammatoires. Ainsi, nous avons complete la partie experimentale de ce travail par l’illustration de l’utilisation d’un modele d’epithelium corneen reconstitue en trois dimensions, et par l’etude d’un modele de coculture entre des cellules epitheliales en lignee et des lymphocytes, le developpement de nouveaux outils toxicologiques permettant une meilleure comprehension des phenomenes physiopathologiques impliques au niveau de la surface oculaire dans la toxicite des conservateurs