The anti-calcification effect of basic fibroblast growth factoron canine saphenous vein interstitial cells in vitro

目的 观察作为组织工程瓣间质种子细胞的犬隐静脉间质细胞体外培养钙化机制,探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对犬隐静脉间质细胞体外培养钙化的抑制作用.方法 分离培养犬隐静脉间质细胞,分为正常培养对照、促钙化培养和bFGF培养3组.2周后行yon kossa染色,检测细胞层钙沉积、碱性磷酸酶(ALP)活性及上清液中骨钙素(OC)含量,细胞ALP、OC mR-NA表达.结果 培养2周后,促钙化组及对照组均有细胞结节形成,bFGF组细胞呈极性密集生长,无结节形成.vor kossa染色促钙化组呈强阳性,bFGF组及对照组呈弱阳性.促钙化组钙沉积及ALP活性比对照组均明显增高(5.384±0.443比2.198±0.173,P＜0.01),ALP高2.13倍(9.611±0.639比4.819±0.334,P＜0.01),bFGF使两者均显著降低(0.192±0.024比5.384±0.443,P＜0.01,3.069±0.178比9.611±0.639,P＜0.01).促钙化组上清液OC含量于第6天始升高,至第12天到达高峰,然后有轻度下降.bFGF组及对照组均维持较低水平.结论 体外培养的犬隐静脉间质细胞在促钙化条件下具有成骨细胞的表型,有明显的钙化现象发生,bFGF具有抑制其钙化的作用。