ATIVIDADE ENZIMÁTICA E EXPRESSÃO DA UREASE EM PLANTAS DE SOJA SUBMETIDAS À HERBIVORIA

Ureases sao metaloenzimas dependentes de niquel, presentes em plantas, bacterias e fungos. Em vegetais, elas atuam na defesa contra fitopatogenos, principalmente fungos e bacterias, sendo sintetizadas pelas plantas em resposta ao ataque de patogenos. Apesar de estarem envolvidas no metabolismo e biodisponibilidade de nitrogenio, pouco se sabe sobre sua regulacao em plantas. Na leguminosa Canavalia ensiformis uma familia genica de ureases foi induzida pelo acido abscisico. Diante disso, o objetivo desse trabalho foi verificar a regulacao da urease em plantas de soja submetidas a herbivoria. Sementes de soja da cultivar Williams 82 foram germinadas e  mantidas em câmaras de crescimento, com condicoes controladas, ate atingir o estadio vegetativo V3. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado em esquema unifatorial com 5 repeticoes. Foi colocada uma lagarta de Spodoptera litorallis sobre a folha central da primeira folha trifoliolada em cada planta tratada. A lagarta permaneceu em contato com a folha por 2 horas a partir da primeira mordida. As folhas tratadas e as folhas das plantas controle foram excisadas e procedeu-se as extracoes de proteinas totais e de RNA e a sintese de cDNA. As variaveis avaliadas foram atividade ureasica, pelo Metodo do fenol-nitroprussiato e a expressao relativa de urease foi calculada usando o metodo 2 -ΔΔCq . Os resultados obtidos foram analisados estatisticamente pelo teste t com 95% de probabilidade. Para a variavel atividade ureasica, nao houve significância para os fatores de tratamento testados. Com relacao a expressao das isoformas de urease, as amostras tratadas diferiram significativamente dos controles. Nas amostras tratadas houve uma superexpressao da urease ubiqua e uma supressao da urease embriao-especifica quando comparadas as plantas controle. Nas condicoes de realizacao deste experimento, e possivel concluir que o tratamento com a Spodoptera litorallis nao interferiu na atividade ureasica, mas regulou a expressao dos genes da urease ubiqua e embriao-especifica, sugerindo que a urease pode estar exercendo papel de defesa na planta.