Transport de zinc dans des cellules du tubule proximal de rein de lapin

Nous avons etudie le transport de zinc dans des cellules du tubule proximal de rein de lapin en utilisant deux techniques differentes. Dans un premier temps, nous avons mesure les influx de #6#5zn dans des cellules proximales isolees. Nous avons ainsi montre que le zinc ionique entrait dans les cellules par un mecanisme de transport saturable, d'affinite compatible avec un fonctionnement en conditions physiologiques ou par diffusion passive. Le zinc peut egalement entrer dans les cellules isolees sous forme complexee a la cysteine ou l'histidine, par un cotransport sodium-acide amine. Dans un deuxieme temps, nous avons utilise des cultures primaires derivees de cellules proximales isolees. Le zinc ionique entre au pole apical de la cellule par un systeme de transport saturable, d'affinite comparable a celle observee sur cellules isolees, et par diffusion passive. La polarite de l'epithelium en culture est confirmee par les caracteristiques du systeme d'influx basolateral: son affinite est du meme ordre de grandeur, mais sa capacite est tres superieure, les efflux de zinc sont egalement polarises, avec une permeabilite accrue de la membrane basolaterale. Enfin, par des techniques de chromatographie a moyenne pression, nous avons pu demontrer la presence, tant dans le cortex renal que dans les cellules proximales en culture, d'un haut niveau de base de metallothioneine, proteine de bas poids moleculaire impliquee dans les processus de stockage et de detoxification des metaux lourds. La presence de zinc en exces dans le milieu de culture induit en quelques heures une neosynthese de metallothioneine. Des experiences preliminaires ne nous ont pas permis de mettre en evidence de modification de l'influx de zinc dans les cellules proximales apres induction de la metallothioneine, ce qui ne permet pas d'exclure un role de cette proteine dans la regulation de l'influx basolateral ou des efflux de zinc