鲫鱼( Carassius auratus )半胱亚磺酸脱酸酶 CSAD 基因克隆及其表达研究

本研究以鲫鱼（ Carassius auratus ）为研究对象，采用巢式PCR和RACE技术克隆鲫鱼半胱亚磺酸脱酸酶 CSAD 基因cDNA序列，并且利用实时荧光定量PCR检测了 CSAD mRNA在鲫鱼不同组织和昼夜节律中的相对表达水平，同时还研究了牛磺酸对鲫鱼肠道 CSAD mRNA表达的影响。结果表明：（1）鲫鱼 CSAD 基因cDNA序列包含186bp的5’UTR序列，675bp的3’UTR序列，1503bp开放阅读框，编码500个氨基酸。同源性分析表明，鲫鱼和鲤鱼的同源性为97.2%。系统发育分析表明，鲫鱼与鲤鱼之间的亲缘关系最接近，置信度为100。经预测，其编码的蛋白质的分子量和等电点分别为56.82kDa和5.77；（2） CaCSAD mRNA在肌肉、心脏、肠道及肝脏中的表达水平较高，在脑和鳃组织中的相对表达量较低；（3）鲫鱼肠道 CSAD mRNA的相对表达量在6：00am点时最高，9：00pm点时相对表达量最低；（4）鲫鱼 CSAD 的相对表达丰度随着牛磺酸添加量的增加而逐渐下降。本研究结果不仅有助于理解鲫鱼 CSAD 基因的分子特征，同时将为进一步研究鱼类 CSAD 营养调控功能提供理论依据。