Activité protéolytique et non protéolytique du protéasome et de ses sous-complexes dans la réponse à l’acide rétinoïque

L’acide retinoique (AR) agit via deux familles de recepteurs nucleaires : les RAR (α, β, γ) et les RXR (α, β, γ) qui sont des facteurs de transcription inductibles par le ligand. L’equipe a montre que l'activite transcriptionnelle de RARα est regulee par des processus de phosphorylation et par le recrutement dynamique de coregulateurs comme SRC‐3 et de sous‐unites du proteasome comme SUG‐1. De plus, a la fin du signal AR, RARα et SRC‐3 sont degrades par le proteasome. J'ai participe a la mise en evidence des effets non genomiques de l'AR qui conduisent a l'activation de cascades kinasiques aboutissant a la phosphorylation de RARα au niveau de deux serines (S369 et S77), puis au recrutement de RARα a l’ADN des genes cibles. J'ai ensuite etudie comment les processus de phosphorylation et le proteasome regulent le fonctionnement de SRC‐3. J’ai montre qu’en reponse a l’AR, SRC‐3 est recrute en meme temps que SUG‐1 au niveau des promoteurs des genes cibles de RARα. Ces deux coregulateurs participent a la dynamique de la transcription. Puis j’ai montre que SRC‐3 est phosphoryle, ubiquitine et degrade par le proteasome. J’ai identifie le residu phosphoryle (la serine 860). Au cours d’un criblage base sur l’utilisation d’une banque de siRNA, j’ai montre que l’ubiquitination/degradation de SRC‐3 met en jeu une E3 ligase du type CLR3 compose de la culline 3 et de Rbx1. L’ubiquitination de SRC‐3 depend de la phosphorylation de la serine 860 et a lieu en dehors de l’ADN suite a la dissociation de SRC‐3 de RARα. Enfin la degradation de SRC‐3 met en jeu SUG‐1. Finalement j’ai analyse le processus de degradation de RARα, en utilisant la meme strategie. Cependant la degradation de RARα ne ferait pas intervenir les mecanismes classiques mais necessiterait la phosphorylation prealable de la serine 369 et la surface de recrutement des coactivateurs. En conclusion, mes travaux ont mis en exergue un role global du proteasome dans la reponse a l'AR puisqu'il participe aussi bien a l'initiation de la transcription, qu'a la degradation finale de RARα et de SRC‐3.