CO-71: Rôle crucial de l'histone acétyl-transférase p300 dans la survie des cellules beta pancréatiques

Introduction Parmi les mecanismes impliques dans la regulation des genes controlant la fonction et la survie des cellules beta, le remodelage de la chromatine par des mecanismes epigenetiques, tels que l'acetylation des histones, est un processus fondamental. L'histone acetyl-transferase p300 est un activateur cle de la machinerie transcriptionnelle. L'objectif de cette etude est d'evaluer les modes de regulation de p300 et son impact « epigenetique » vis-a-vis d'un programme de differenciation/survie beta-cellulaire dans des conditions physiologiques et dans des situations physiopathologiques plus particulierement liees a la proteotoxicite induite par la proteine amyloide de l'ilot. Materiels et Methodes Les experiences sont realisees avec des cellules beta en culture (lignee INS-1E), des ilots pancreatiques isoles et des sections pancreatiques de souris [souris controles vs souris transgeniques exprimant la forme humaine toxique du polypeptide amyloide de l'ilot (h-TG)]. Les partenaires proteiques de p300 sont identifies par immunoprecipitation. Les niveaux proteiques de p300 sont evalues par western-blot et immunofluorescence. L'apoptose est mise en evidence par l'activation/le clivage de la caspase-3. Resultats L'invalidation de p300 par siRNA entraine l'apoptose des cellules beta. Parmi les mecanismes impliques dans le role anti-apoptotique de p300, nous montrons qu'une stimulation aigue par le glucose et/ou le GLP-1 favorise l'interaction de p300 avec la forme phosphorylee/active de CREB (cAMP-Responsive Element Binding protein), un facteur de transcription crucial pour la survie des cellules beta. De maniere interessante, les niveaux nucleaires de p300 evalues par fractionnement subcellulaire et immunofluorescence, sont diminues dans les cellules beta de souris h-TG, un modele murin de proteotoxicite recapitulant les deficits beta-cellulaires du diabete de type 2 humain. Conclusions Cette etude revele pour la premiere fois l'implication de la fonction histone acetyl-transferase p300 dans la survie beta-cellulaire, ainsi que son alteration dans les cellules beta soumises a un environnement diabetogene.