Optimización de técnicas para aislamiento y ruptura de quistes de Giardia spp

Objetivos: Optimizar y evaluar tecnicas de ruptura de quistes de Giardia spp para obtener ADN, paso previo a pruebas moleculares. Diseno: Experimental. Institucion: Instituto de Medicina Tropical Daniel A. Carrion, Facultad de Medicina, UNMSM. Material biologico: Muestras de heces con quistes de Giardia. Intervenciones: Las muestras de heces con abundantes quistes de Giardia fueron evaluadas con una tecnica de obtencion de quistes y tres de desenquistamiento. Tecnica 1: sedimentacion rapida; el sedimento fue lavado varias veces con agua destilada y centrifugado. Para el desenquistamiento, los quistes fueron incubados a: Tecnica A: 37°C con bilis de cerdo. Tecnica B: con HCl 0,1 N y luego hipoclorito de sodio al 20% a 37°C. Tecnica C: Por duplicado, cinco ciclos de congelamiento (-20°C), calentamiento (80°C) y luego papaina a 60°C. Se conto en camara Newbauer el numero de quistes antes y despues de cada prueba. Principales medidas de resultados: Mayor numero de trofozoitos. Resultados: La tecnica B rindio mayor numero de trofozoitos que la A. La C no tuvo exito. Conclusiones: Desenquistar con HCl 1N e hipoclorito de sodio al 20% a 37°C fue buen metodo para obtener trofozoitos de Giardia.