Diagnóstico de leptospirosis: evaluación de un enzimoinmunoensayo en fase sólida en diferentes etapas de la enfermedad

OBJETIVO: Desarrollar un enzimoinmunoensayo en fase solida (ELISA) para la determinacion de inmunoglobulinas G (IgG) (especifico de genero) y evaluarlo en diferentes etapas de la enfermedad. METODOS: Se analizaron 1 077 muestras sericas de 812 pacientes con sospecha de leptospirosis derivadas al laboratorio del Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias (INER) de la ciudad de Santa Fe, Argentina, entre 1999 y 2005. A partir de un criterio de definicion de casos basado en los resultados de la microaglutinacion (MAT) y del recuento de leucocitos, y de los valores de neutrofilia, se incluyeron en el estudio 182 casos confirmados (267 muestras), 167 casos negativos (293 muestras) y 40 casos probables (60 muestras). Cada muestra se clasifico segun el tiempo de evolucion de la enfermedad en tres etapas: primera ( 25 dias). En el ELISA, se utilizo como antigeno un extracto de una mezcla de las serovariedades Pyrogenes y Tarassovi cultivadas en medio liquido, tratado con ultrasonidos e inmovilizado por adsorcion en placas de poliestireno. Como anticuerpo secundario se empleo un anticuerpo monoclonal de cabra anti-IgG humana conjugado con peroxidasa. El valor de corte, la sensibilidad y la especificidad del ELISA se determinaron utilizando como patron la definicion de casos. Para determinar el valor de corte optimo se calculo el area bajo la curva de eficacia diagnostica (curva ROC). RESULTADOS: La sensibilidad de la prueba evaluada aumento considerablemente en la segunda etapa (93,2%), con respecto a la primera (68,1%), y descendio en la tercera (78,8%). La especificidad aumento gradualmente desde el 96,3% en la primera etapa hasta el 100% en la tercera. CONCLUSIONES: Los resultados obtenidos indican que esta prueba de ELISA puede ser de gran utilidad como complemento de la MAT para el diagnostico de la leptospirosis en todas las etapas y, en particular, para adelantar el diagnostico de la enfermedad aguda.