Aplicación de la cromatografía de líquidos acoplada a analizadores de simple y triple cuadrupolo en análisis alimentario y biológico
2013
En la presente Tesis se desarrollan metodologias analiticas, basadas en cromatografia de liquidos de alta presion (HPLC) o cromatografia de liquidos de ultra eficacia (UHPLC) acopladas a detectores de espectrometria de masas (MS) con analizadores cuadrupolares (simple o triple cuadrupolo), para la determinacion de compuestos organicos en el campo alimentario (calidad y seguridad) y biologico. Asimismo, se han dirigido los esfuerzos a optimizar los procesos de tratamiento y extraccion de muestra, a fin de maximizar la sencillez y rapidez de aplicacion. El trabajo se organiza en tres grandes bloques. En el primer bloque se desarrollan y/o revisan metodologias analiticas que permiten una correcta evaluacion de la seguridad alimentaria, mediante la determinacion de residuos de plaguicidas, medicamentos veterinarios e hidrocarburos aromaticos policiclicos (PAHs), empleando tecnicas de cromatografia de liquidos acopladas a MS. El primero de los trabajos de este bloque desarrolla y valida una metodologia analitica basada en UHPLC acoplada a espectrometria de masas en tandem (MS/MS) para la cuantificacion y confirmacion de residuos de plaguicidas en citricos utilizando extraccion solido-liquido (SLE), no siendo necesario aplicar una etapa de limpieza. El metodo desarrollado se aplica al analisis en rutina de 365 muestras de citricos durante el periodo de un ano (2006). El segundo trabajo utiliza HPLC-MS para evaluar la eliminacion de diferentes residuos de medicamentos veterinarios en musculo de dorada procedente de acuario tras ser alimentada con piensos medicados. En el ultimo trabajo de este bloque se hace una revision de la metodologia analitica existente, basada en tecnicas cromatograficas acopladas a distintos sistemas de deteccion, para la determinacion de residuos de plaguicidas y PAHs en aceite de oliva. En el segundo bloque se utiliza HPLC-MS para evaluar diferentes parametros muy utiles en la evaluacion de la calidad alimentaria, como son la determinacion de compuestos de bajo peso molecular. El primer trabajo de este bloque desarrolla y valida una metodologia analitica basada en HPLC-MS para la cuantificacion y confirmacion de acidos organicos (citrico y malico) en tomate, pimiento y naranja utilizando SLE, sin necesidad de realizar posteriormente una etapa de limpieza. En el segundo trabajo se desarrolla y valida una metodologia analitica basada en HPLC-MS para la cuantificacion y confirmacion de vitamina C (acido ascorbico) en alimentos fortificados (cereales de desayuno, zumos y alimentos infantiles) utilizando SLE cuando se trata de muestras solidas, o bien una simple dilucion cuando se trata de muestras liquidas. Finalmente, en el ultimo bloquese aplica UHPLC-MS de triple cuadrupolo para el analisis de muestras biologicas. Se ha desarrollado y validado un metodo para la cuantificacion y confirmacion de diferentes familias de neurotransmisores en cerebro de rata utilizando un tratamiento de muestra basado en SLE. Los neurotransmisores son sustancias de elevado interes, debido a su importancia en el sistema nervioso, en los procesos metabolicos y en el sistema inmunologico. Asi, la aportacion que hace esta Tesis Doctoral de una metodologia rapida y fiable para el analisis de estos compuestos, es muy valiosa sobre todo en el campo de la investigacion biomedica y en la medicina clinica.
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