HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中长春花碱的浓度及药动学研究

目的：建立HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中长春花碱的浓度。方法：血浆样本加入适量内标,经乙腈直接沉淀蛋白后采用HPLC-MS/MS进行分析。色谱柱采用Ultimate C（18）柱（150 mm×2.1 mm,5.0μm）;流动相由乙腈-10 mmol·L^（-1）醋酸铵（含0.1%甲酸）（49：51）组成,柱温40℃;流速0.3 ml·min^（-1）;采用电喷雾离子源（ESI）,以多反应监测方式（MRM）进行定量分析。长春花碱和内标长春新碱在正离子模式下定量分析离子对分别为m/z 811.4→m/z 224.2和m/z 825.4→m/z 807.4。结果：长春花碱在0.475-950 ng·ml^（-1）内线性关系良好（r=0.997 1）,最低定量限为0.475 ng·ml^（-1）,提取回收率为89.15%^95.28%,日内、日间精密度RSD均不高于7.95%。药动学研究结果表明,长春花碱在大鼠体内的t（1/2）为（5.86±2.37）h,AUC（0-t）和AUC（0-∞）分别为（68.45±14.51）,（95.03±33.09）μg·L~（-1）·h。结论：该方法分析速度快、灵敏、准确,为临床进一步研究长春花碱和药物转运体提供了基础。长春花碱在大鼠体内的浓度较低,半衰期较长。