Etude et caractérisation du rituximab sur surface antigénique : conception de mimes d'anticorps

Parce qu’ils reconnaissent les antigenes tumoraux de maniere tres specifique, les anticorps monoclonaux (mAb) sont devenus un outil majeur pour le traitement de nombreux cancers. Malgre l’amelioration des taux de remission, les mAbs presentent des inconvenients dont un poids moleculaire important freinant leur penetration tumorale, un polymorphisme genetique rendant le traitement parfois inoperant, et une production par voie biologique couteuse. La conception de mimes synthetiques de mAbs de petite taille est donc un moyen attractif de contourner ces problemes. Afin de developper des mimes de grande efficacite et de haute specificite, nous avons realise une etude approfondie de l’interaction anticorps/antigene appliquee a l’interaction rituximab/CD20 impliquee dans le traitement de certains lymphomes. La conception de ces mimes d’anticorps est basee sur des constructions macromoleculaires associant de courtes sequences peptidiques composant le paratope du rituximab. La selection des peptides les plus affins dans le processus de reconnaissance a ete effectuee par une technique d’analyse de surface, la resonance plasmonique de surface (SPR – Biacore). Ces etudes ont necessite le developpement de surfaces antigeniques dont la densite surfacique en CD20 a ete optimisee pour realiser du criblage peptidique. La caracterisation de ces surfaces fonctionnelles par microbalance a quartz (QCM-D), ellipsometrie spectroscopique (SE), et SPR a permis d’acquerir de nombreuses informations dont l’influence de la distance inter-CD20 sur la reconnaissance du mAb. Suite au criblage, les sequences peptidiques des zones d’interaction du paratope avec lesquelles le CD20 vient interagir ont pu etre determinees avec une grande precision. Elles ont par la suite ete assemblees sur un châssis moleculaire pour la confection des mimes de mAb synthetiques.