Avaliação citotóxica in vitro do complexo metálico derivado do cobre II [Cu(BTACl)(phen)ClO4] em TG180, Raw 264.7 (macrófago), Erlich e NIH-3T3 (fibroblasto)

Introducao: Uma neoplasia ocorre por meio do acumulo de mutacoes no DNA e, para combate-la, pode-se combinar varios metodos de tratamento como cirurgia ou quimioterapia. Basicamente faz-se uso de medicamentos que atacam celulas tumorais e param ou retardam o crescimento das celulas que se dividem rapidamente. Dentre os varios tipos de quimioterapicos existem os alquilantes, que sao capazes de substituir em outra molecula um atomo de hidrogenio por um radical alquil. Eles se ligam ao DNA de modo a impedir a separacao dos dois filamentos do DNA na dupla helice, fenomeno este indispensavel para a replicacao. Nessa categoria de agentes sao incluidos os complexos metalicos. Compostos com cobre tem vantagens sobre outras drogas com efeitos secundarios, pois ele e um elemento traco importante para funcao de varias enzimas relacionadas a sintese de DNA, metabolismo e respiracao celular. Do metodo de acao, ja foi constatado que compostos a base de Cobre (II) tem capacidade de clivar o DNA das celulas tumorais, alvo desse mecanismo. Um dos compostos a base de Cobre (II) que pode ser alternativa para a producao de um farmaco e [Cu(BTACl)(phen)ClO4].Objetivo: Avaliar a atividade citotoxica in vitro do complexo metalico derivado do cobre II [Cu(BTACl)(phen)ClO4] nas linhagens nao tumorais Raw 264.7 e NIH-3T3 e nas linhagens tumorais TG180 e Ehrlich. Metodologia: As linhagens foram cultivadas em meio RPMI-1640 suplementado soro fetal bovino 10% e antibioticos em microplaca de 96 pocos e a viabilidade celular foi determinada pelo teste do Alamar Blue. Os complexos de cobre foram diluidos e colocados na placa e apos 24 horas incubada, foi adicionado em cada poco o agente revelador Alamar Blue, procedendo a leitura apos 6 horas de incubacao. Os experimentos foram realizados em quadruplicata. A leitura da placa foi realizada em um espectrofotometro a 540 e 630nm. Resultados e discussao: Observou-se uma citotoxicidade dose-dependente do complexo sobre as linhagens TG180 e RAW264.7, apresentando uma concentracao inibitoria de 50% da viabilidade celular (IC50) de 31,435μM e 14,92μM, respectivamente. Para as linhagens Ehrlich e NIH-3T3 obteve-se IC5014,95μM e 19,215μM. Os resultados indicam que o [Cu(BTACl)(phen)ClO4] e mais seletivo para o tumor de Ehrlich (carcinoma mamario) em relacao ao sarcoma 180, uma vez que o indice de seletividade obtido, comparando-se com a celula nao tumorigenica NIH-3T3, foi de 1,28 para Ehrlich e 0,61 para TG180. Porem, indices de seletividades ideais devem ter valor acima de 2. Conclusao: Para estas linhagens, o composto estudado apresentou seletividade minima, portanto nao ideal para os padroes estabelecidos para ensaios in vitro com celulas tumorais. No entanto, nao se deve descartar testes em outras linhagens que podem apresentar resultados diferentes. Existem ainda metodos de direcionamento especifico de quimioterapicos como nano-emulsoes e sistemas de drug delivery que podem alterar esse panorama em ensaios in vivo, permitindo maior seletividade e eficacia.