Stratégies thérapeutiques innovantes pour le traitement de la maladie de Wilson

Nanoparticules lipidiques pour la delivrance ciblee de chelateurs du cuivre : application a la maladie de Wilson La maladie de Wilson est l'une des principales anomalies genetiques du metabolisme du cuivre chez l'homme. Des mutations au niveau du gene codant pour une ATPase a cuivre (ATP7B) entrainent une accumulation de cuivre a un niveau toxique dans les cellules du foie (hepatocytes) et le cerveau. Les traitements actuels principalement la D-Penicillamine (Trolovol®) et la triethylenetetramine (Trientine®) sont des chelateurs de cuivre et permettent de stimuler son excretion dans les urines. Cependant, ces traitements presentent un certain nombre d'effets indesirables entrainant une faible compliance. Precedemment au laboratoire SYMMES, un chelateur de cuivre a ete developpee afin de pieger efficacement le Cu(I) present en exces dans les hepatocytes. Ce promedicament est base sur un chelateur bioinspire, specifique du cuivre au degre d'oxydation +1, fonctionnalise a des sucres N-acetyl-D-galactosamine (GalNAc) pour la reconnaissance specifique par les recepteurs aux asialoglycoproteines (ASGPR). Dans la cadre de ce projet de these, une approche originale a ete envisagee et consiste a utiliser des nanoparticules lipidiques (NLC, Lipidots®) developpees au laboratoire DTBS contenant un analogue lipophile d'un chelateur de cuivre et dont la surface est fonctionnalisee par des unites GalNAc pour la delivrance dans les cellules hepatiques. Une premiere partie de ces travaux de these a ete consacree a la fonctionnalisation par des GalNAC a la surface des nanoparticules. Apres formulation en presence de surfactants fonctionnalises par des GalNAc et quantification par UPLC-ELSD, l'internalisation de ces nanoparticules a ete evaluee par cytometrie en flux. L'interaction de ces nanoparticules avec une lectine modele a ete realise par SPR en collaboration avec l'IBS. Dans une deuxieme partie, l'encapsulation de chelateurs lipophiles a ete evaluee par HPLC couple a l'extraction en phase solide (SPE). L'aptitude de ces nanoparticules a liberer le chelateur et a pieger le cuivre ont ete evalues sur deux types de cellules hepatiques (sauvages et sans ATP7B) en collaboration avec le laboratoire LCBM.