胆汁酸通过p-STAT3-SOCS3途径调节下丘脑神经元食欲及抑制信号肽表达

目的探索胆汁酸牛磺石胆酸或鹅去氧胆酸对小鼠下丘脑GT1-7细胞食欲抑制信号肽表达的影响及可能的作用途径。 方法将实验分为3组，每组3个平行样本。空白对照组：仅给予含10%胎牛血清高糖培养基培养GT1-7细胞。胆汁酸牛磺石胆酸处理组：分别采用10 nmol/L，100 nmol/L，1 μmol/L和10 μmol/L浓度的胆汁酸牛磺石胆酸处理GT1-7细胞12、24和48 h。鹅去氧胆酸处理组：分别采用10 nmol/L，100 nmol/L，1 μmol/L和10 μmol/L浓度的鹅去氧胆酸处理GT1-7细胞12、24和48 h。采用Real-time PCR检测GT1-7细胞食欲抑制信号肽阿黑皮素原（POMC）mRNA表达水平；ELISA法检测POMC剪切产物抑制食欲肽α-促黑素细胞激素水平。采用Western blot检测G蛋白偶联胆汁酸受体（TGR5）和法呢醇X受体表达以及磷酸化信号转导转录激活因子3（p-STAT3），磷酸化蛋白激酶（p-AKT），细胞因子信号传导抑制因子3（SOCS3）蛋白表达量。 结果Western blot结果显示，下丘脑神经元GT1-7细胞能表达TGR5和FXR两种胆汁酸受体，且表达量受胆汁酸调节。Real-time PCR检测结果显示，10 μmol/L tLCA或鹅去氧胆酸处理GT1-7细胞24 h后POMC mRNA表达水平上升，ElISA结果也发现10 μmol/L胆汁酸牛磺石胆酸或鹅去氧胆酸处理GT1-7细胞24 h后具有抑制食欲作用的POMC衍生肽[α]-MSH释放增多。Western blot结果显示，胆汁酸处理可上调GT1-7细胞p-STAT3和p-AKT蛋白表达，且调控STAT3信号通路的SOCS3蛋白表达也有增加。 结论胆汁酸牛磺石胆酸或鹅去氧胆酸通过GT1-7细胞胆汁酸受体TGR5和FXR促进POMC mRNA表达，增加[α]-促黑素细胞激素水平，提示胆汁酸具有通过抑制食欲信号肽表达调节食欲的潜在作用，该作用是通过p-AKT和p-STAT3 -SOCS3信号通路实现。