IL-2＋IL-15组合培养方案对乳腺癌患者外周血中NK细胞体外扩增的效果

目的：观察IL-2＋IL-15组合体外培养方案对于NK、NKT和T细胞亚群的比例、表型、杀伤肿瘤细胞活性与黏附活性的影响，并初步探讨其作用机制。方法：采集天津医科大学附属肿瘤医院生物治疗科2012年5月至2012年7月期间收治的5例乳腺癌患者的外周血单个核细胞（peripheralbloodmononuclearcell，PBMC），用IL-2＋IL-15联合培养方案进行培养，观察培养15d后细胞的扩增倍数和淋巴细胞亚群比例变化，流式细胞术检测细胞免疫表型、细胞表面受体的表达，LDH释放法和CDl07a释放法检测不同细胞亚群对于HLA匹配或不匹配的靶肿瘤细胞系的杀伤活性，活细胞工作站检测总扩增产物对于不同靶肿瘤细胞系的黏附作用。结果：与扩增前相比，IL-2＋IL-15培养方案扩增15d后，NK细胞[（36．74±17．10）％VS（16．34±3．12）％，P〈0．05]、NKT细胞[（24．88±12．34）％vs（4．06±2．05）％，P〈0．05]比例显著增加，CD4’T细胞和Treg细胞比例显著降低（P〈0．05），CD8’T细胞比例显著升高（P〈0．05）；NK细胞表面活化受体NKp30[（92．384-7．19）％协（32．14-4-17．64）％，P〈0．05]、NKp44[（74．264-16．28）％Y．S（1．94±1．60）％，P〈0．05]、NKG2D[（98．58±1．28）％郴（66．50±24．84）％，P〈0．05]的表达率均显著升高，CDl6表达率显著降低[（85．124-7．66）％VS（95．604-2．53）％，P〈0．05]；NKT细胞、T细胞表面活化受体DNAM一1和NKG2D明显升高（P〈0．05）。总扩增产物、NK细胞和NKT细胞对HLA不匹配的靶肿瘤细胞的杀伤率均显著高于HLA匹配靶细胞系的杀伤（P〈0．05）；在共孵育至84min时，与HLA匹配的靶肿瘤细胞系相比，总扩增产物细胞与HLA不匹配的靶细胞系黏附结合数目显著增多[（4．804-0．53）”s（2．254-0．35）个，P〈0．05]。结论：IL-2＋IL-15组合方案在扩增NK细胞的同时，也能够有效扩增NKT细�