促肾上腺皮质激素释放激素对下丘脑神经元胞浆内环磷酸腺苷和Ca^2＋浓度的调节作用

背景：在应激反应中，下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴的激活对下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素表达的增加起着关键的作用。然而关于通过何种途径调控下丘脑神经元表达促肾上腺皮质激素释放激素的神经内分泌活性，促肾上腺皮质激素释放激素能否激活下丘脑神经元，尚不十分清楚。 目的：通过外源性促肾上腺皮质激素释放激素刺激培养下丘脑神经元，以观察细胞内环磷酸腺苷和胞浆内钙离子浓度的变化。 设计：观察对比实验。单位：解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所，首都医科大学附属天坛医院神经外科。 材料：实验于1999—12／2002—03在解放军第三军医大学大坪医院完成。取孕17d胎鼠下丘脑分散培养下丘脑神经元。 方法：用外源性促肾上腺皮质激素释放激素刺激培养下丘脑神经元，促肾上腺皮质激素释放激素1受体特异性拮抗剂CP-154526预先处理下丘脑神经元。将培养的细胞分组：①促肾上腺皮质激素释放激素（10^12，10^-10，10^-8，10^-6mol／L）刺激组。②预先用CP-154526（500μmol／L）处理再用促肾上腺皮质激素释放激素（10^12，10^-10，10^-8，10^-6mol／L）刺激组。③分别设置相应的正常对照组，正常对照组用等渗盐水刺激。用PTI荧光成像系统测量和分析外源性促肾上腺皮质激素释放激素对培养下丘脑神经元胞浆内游离钙浓度变化，用放射免疫方法测定神经元内环磷酸腺苷含量。 主要观察指标：①下丘脑神经元胞浆内游离钙浓度。②下丘脑神经元内环磷酸腺苷含量。 结果：正常对照组的下丘脑神经元胞浆内游离钙浓度和环磷酸腺苷含量较低，外源性促肾上腺皮质激素释放激素刺激后，胞浆内游离钙浓度立即升高，神经元胞浆内环磷酸腺苷生成明显增加[（240±22），（153±11）nmol／L；（3．26±0．19），（0．44±0．02）pmo