洛蒙德链霉菌S015中 cutR / cutS 双组分调控系统对洛蒙真菌素合成的调控

背景 cutR / cutS 双组分调控系统在链霉菌次级代谢过程中起重要作用。 目的通过同源重组的方法在野生型S015菌株中分别敲除 cutR 和 cutS ，构建单基因缺失突变株，研究 cutR/cutS 双组分调控系统对洛蒙真菌素合成的调控。 方法对突变株及野生型菌株的发酵产物进行高效液相色谱法(High performance liquid chromatography，HPLC)分析，通过qPCR测定基因表达量的变化。 结果HPLC产物分析发现，S015Δ cutR 和S015Δ cutS 中洛蒙真菌素产量分别达到了128.1±26.4 mg/L和61.8±4.5 mg/L，分别为野生型S015产量的11.5倍和5.5倍。qPCR检测发现，S015Δ cutR 突变株中 lomo14 、 lomo10 、 lphzB 、 lphzC 、 lphzE 和 lphzG 的表达量分别达到野生型的1 151.7±88.8、110.5±5.8、129.3±7.7、380.2±34.6、348.2±42.1和299.8±38.2倍；S015Δ cutS 突变株中 lomo14 、 lomo10 、 lphzB 、 lphzC 、 lphzE 和 lphzG 的表达量分别达到野生型的4.3±0.5、2.2±0.2、9.3±0.9、10.3±0.6、20.7±1.5和20.4±0.8倍。 结论 cutR / cutS 双组分调控系统在洛蒙德链霉菌的洛蒙真菌素合成过程中对其合成途径核心基因和侧链修饰基因的表达有抑制作用，从而抑制其合成。