Estudo da composição de laranjas brasileiras (Citrus sinensis) e seu uso como comprovação de autenticidade de suco de laranja

Amostras autenticas de suco de laranja (Citrus sinensis) das variedades Pera, Natal, Harnlin, Valencia, Baia e Lima, amostras autenticas de suco de laranja concentrado (SLC) e agua de lavagem da polpa ("pulp wash") e amostras comerciais de suco de laranja fresco (SLF) e congelado foram analisadas quanto a presenca dos seguintes compostos: flavanonas glicosidicas (FG), flavonas polimetoxiladas (FPM) e carotenoides e isotopos estaveis de carbono 13, oxigenio 18 e deuterio. As flavanonas glicosidicas narirutina e hesperidina foram analisadas por cromatografia liquida de alta eficiencia (CLAE) com detector de UV a 280 nrn. Os niveis de narirutina e hesperidina obtidos em amostras autenticas variaram entre 16 e 142 mgIL e 104 e 537 mgIL, respectivamente. A razao hesperidina/narirutina apresentou diferencas de acordo com a variedade. A variedade Pera apresentou a maior razao (media de 8,3) e a variedade Baia a menor (3,6): Suco de laranja concentrado (apos diluicao para 12 °Brix) apresentou maiores quantidades de FG com teores de narirutina variando entre 62 e 98 mg/L e de hesperidina, entre 531 e 690 mg/L. Em suco de laranja concentrado, preparado a partir de agua de lavagem da polpa, o nivel de narirutina variou entre 155 e 239 mg/L e o de hesperidina entre 1089 e 1200 mg/L. A analise de amostras de suco de laranja fresco, obtidas junto a supermercados indicou que o conteudo de FG da maioria delas (13 a 95 mgIL e 106 a 587 mg/L respectivamente, para narirutina e hesperidina) era similar aqueles encontrados para amostras autenticas. Seis flavonas polimetoxiladas foram determinadas em termos de quantidade relativa e a sinensetina quantificada em amostras de suco de laranja. As FPM foram extraidas com tolueno e analisadas utilizando CLAE com coluna de fase reversa e deteccao a 340 nrn. A identificacao dos picos foi baseada no espectro de UV-visivel e na ordem de eluicao descrita pela literatura. Sucos de laranja autenticos continham de 0,06 a 0,12 mg/L de sinensetina com teores mais elevados encontrados nas variedades Pera e Natal. Amostras autenticas obtidas junto a industrias de suco (SLC e agua de lavagem da polpa), e amostras de suco de laranja concentrado e de suco de laranja fresco adquiridas no comercio continham, tipicamente, no minimo 10 vezes mais sinensetina que aquelas obtidas por extracao manual do suco. A razao das areas dos picos das FPM das diferentes variedades foi examinada utilizando analise canonica discriminante. Este procedimento distinguiu as variedades Pera e Harnlin das variedades Natal e Valencia, quando obtida por extracao manual. Da mesma. forma, os sucos obtidos por extracao manual foram facilmente distinguidos daqueles de origem industrial, ou seja, suco de laranja concentrado, agua de lavagem da polpa e de suco de laranja fresco. Os seguintes carotenoides foram determinados em amostras de suco de laranja: luteina, zeaxantina, J3-criptoxantina, a,-caroteno e J3-caroteno. Os carotenoides foram extraidos com acetato de etila e analisados por CLAE utilizando detector na regiao do visivel a 450 nm. A concentracao total de carotenoides em amostras autenticas variou entre 0,11 e 1,21 mg/L, enquanto que J3-caroteno, a mais importante fonte de vitamina A, foi detectado em ordem decrescente de concentracao nas variedades Pera, Valencia, Hamlin, Natal, Lima e Baia. Os carotenoides totais presentes em amostras de suco de laranja concentrado obtidas das fabricas variaram entre 0,26 e 0,48 mg/L, enquanto que as amostras adquiridas no comercio continham quantidades ligeiramente superiores (0,46 - 0,81 mg/L). Suco concentrado de laranja de agua de lavagem da polpa apresentou concentracoes muito menores variando entre 0,04 e 0,08 mg/L dos carotenoides totais. Amostras de suco de laranja fresco obtidas no comercio continham carotenoides variando entre 0,04 e 0,55 mg/L, com apenas uma amostra apresentando teores fora da faixa encontrada para as amostras autenticas. Analise isotopica foi a tecnica utilizada para caracterizar amostras autenticas de suco de laranja. Fracionamento isotopico natural de, posicao especifica medido ~r ressonância magnetica nuclear (FINPE-RMN) foi empregado para determinar as razoes de deuterio/hidrogenio, nas posicoes metil [(D/H)r] e metileno [(D/H)n], do etanol produzido pela fermentacao do suco de laranja em condicoes controladas. Espectrometria de massas da razao dos isotopos estaveis (EMRIE) foi utilizada para determinar a quantidade de carbono 13 (13C/12C, em partes per mil; "%0") no mesmo etanol. EMRIE foi tambem utilizado para a quantificacao de oxigenio 18 e80/160, %o) na agua do suco da fruta. As razoes medias determinadas para (D/H)y, (D/H)n, 13C;12C e 180/160 em amostras autenticas de suco de laranja foram respectivamente de: 102.3ppm (DP = 1,7); 126,5 ppm (DP = 1,8). -26.5 %o (DP = 0.9) e +2,27 %o (DP = 2.5). Estas tecnicas isotopicas (FINPE-RMN e RIEEM de carbono-13) podem ser consideradas importantes ferramentas para determinar simultaneamente a adicao nao declarada de acucar de cana e milho (RIEEM) e acucar de beterraba (FINPE-RMN) em suco de laranja. Nenhuma das amostras do varejo foram adulteradas a niveis que pudessem ser detectados por qualquer dos metodos isotopicos empregados. Abstract