特发性血小板减少性紫癜患儿骨髓MSC TGF-β1和HGF的表达及对免疫的调节作用的研究

目的：研究特发性血小板减少性紫癜（Idiopathic thrombocytopenic purpura，ITP）患儿骨髓间充质干细胞（Mesenchymal stem cells，MSC）体外的免疫抑制能力。方法：采集ITP患儿和对照儿童的骨髓标本，分离、培养和扩增MSC，观察细胞形态及增殖能力，计数分析骨髓MSC成纤维细胞集落形成单位（Colony forming unit—fibroblast，CFU—F）；采用混合淋巴细胞反应检测骨髓MSC体外对淋巴细胞的免疫抑制能力；采用RT—PCR和ELISA方法检测骨髓MSC细胞内转化生长因子-β1（Transforming growth factor—β1，TGF—β1）和肝细胞生长因子（Hepatocyte growth factor，HGF）mRNA的表达水平和细胞培养上清中因子的浓度。结果：（1）ITP患儿的骨髓MSC呈典型的成纤维样细胞形态，CFU—F计数（21．29±5．25）与对照组骨髓MSC的CFU—F计数（22．33±5．33）无显著差异（P〉0．05）；（2）ITP患儿骨髓MSC免疫抑制率[（74．93±8．01）％]与对照组骨髓MSC免疫抑制率[（76．42±8．80）％]比较无显著性差异（P〉0．05）；（3）ITP患儿骨髓MSC细胞内TGF—β1、HGF mRNA的表达水平与对照组比较均无显著性差（P〉0．05）；（4）ITP患儿骨髓MSC培养上清中TGF—β1的浓度[（617．88±81．89）pg／ml]与对照组骨髓MSC培养上清中TGF—β1的浓度[（632．40±126．90）pg／ml]比较无显著性差异（P〉0．05）；ITP患儿骨髓MSC培养上清中HGF浓度[（520．20±30．67）pg／ml]与对照组骨髓MSC培养上清巾HGF的浓度[（521．56±36．72）pg／ml]比较无显著性差异（P〉0．05）。结论：ITP患儿骨髓MSCTGF—β1和HGF的表达水平及免疫抑制能力与对照组比较无显著性差异。