Avaliação do uso de SOF (Fluido De Oviduto Sintético) e CLA (Ácido Linoleico Conjugado) na expressão gênica de genes relacionados ao metabolismo lipídico e maturação oocitária em COCs (Complexos Cumulus-Oócito) bovinos

Visando o desenvolvimento de um meio capaz de suportar todas as etapas da producao in vitro de embrioes bovinos, o objetivo desse estudo foi investigar se a utilizacao de fluido de oviduto sintetico (SOF) acrescido ou nao de acido linoleico conjugado (CLA) durante a maturacao in vitro de oocitos bovinos altera a abundância de transcritos ligados ao metabolismo lipidico e maturacao oocitaria. Os complexos cumulus-oocito (COCs) foram aspirados de ovarios obtidos em abatedouro e maturados em quatro grupos: M199 (Medium 199), M199+CLA (M199 com 100 µM de CLA), SOF e SOF+CLA (SOF com 100 µM de CLA). A abundância relativa de RNAm de oocitos e celulas do cumulus foi avaliada apos a maturacao. As amostras de RNA total foram tratadas com DNAse antes de serem submetidas ao protocolo de transcricao reversa. Foram realizadas analises de RT-qPCR dos genes FADS2 (fatty acid desaturase 2), SCD1 (stearoyl-CoA desaturase 1), SREBP1 (sterol regulatory element binding transcription factor 1), GREM1 (gremlin 1), AREG (amphiregulin) e COX2 (cyclooxygenase 2). O Gene PPIA (peptidylprolyl isomerase A) foi utilizado como referencia e o metodo ∆∆Ct com correcao de eficiencia foi usado para calcular os valores de expressao relativa (genes alvo/PPIA) para cada gene alvo usando uma amostra de controle como calibrador. As amostras foram distribuidas em delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 2x2, totalizando 4 tratamentos, com 5 repeticoes. Os dados foram submetidos a analise de variância e em caso de diferenca significativa (p<0,05) as medias foram comparadas pelo teste de Tukey a 5% de significância. COCs maturados com SOF apresentam maior abundância relativa de RNAm dos marcadores qualidade GREM1 (p=0,0065) e COX2 (p=0,0040) em oocitos e GREM1 (p=0,0004) em celulas do cumulus. O meio SOF tambem proporciona maior abundância relativa de FADS2 (p=0,0001), essencial para o metabolismo lipidico, em oocitos. Adicionalmente, oocitos maturados com SOF apresentam menor abundância relativa de SCD1 sem influencia da adicao de CLA. Em contrapartida, a abundância relativa de SCD1 e reduzida no meio M199 com a utilizacao de CLA. Concluimos que o meio SOF proporciona maior abundância de marcadores de qualidade em oocitos independentemente da adicao de CLA.