龙眼 Dlf3h 基因的克隆、表达及其生物信息学分析

本研究应用聚合酶链式反应 (PCR) 技术对龙眼黄烷酮 - 3 - 羟化酶基因 ( Dlf3h ) 进行克隆；运用实时荧光定量 PCR (Quantitative real time PCR) 技术对 Dlf3h 基因在龙眼根、茎、叶组织中的表达进行分析；采用生物信息学方法对 Dlf3h 蛋白理化性质、信号肽、亚细胞定位、亲疏水性、二级结构、三级结构等进行预测。结果表明：成功克隆获得一条长度为 1 098 bp 的 Dlf3h 基因，由 366 个氨基酸组成；该基因在根中表达量最高，其次为叶，在茎中表达量最低；生物信息学分析表明 Dlf3h 没有信号肽和跨膜结构，是一种可溶性亲水蛋白，定位于细胞核内；二级结构元件主要由 α - 螺旋和无规则卷曲组成，具有卷曲螺旋； Ramachandran 评估表明应用 SWISS-MODEL 构建的三级结构模型可靠，其配体结合位点为 217 His 和 275 His 。本研究结果为进一步研究龙眼类黄酮合成的分子调控机制提供依据。