三类整合酶基因（intI）的简并引物PCR方法建立及应用

目的建立一种筛选第一、二和三类整合酶基因(intⅠ)的简并引物PCR方法,并对临床菌株进行整合子筛选和分类. 方法用梯度PCR方法确定PCR反应的最适退火温度,并对16株临床标本进行PCR扩增,通过对阳性PCR扩增产物的限制性内切酶分析进行整合子分类. 结果根据梯度PCR结果确定最适退火温度为46℃.应用简并引物PCR法检测16株临床分离株,其中8株阳性,经酶切分类后确定其中4株只含有第一类整合酶基因,有3株含有第二类整合酶基因,1株同时含有第一类和第二类整合酶基因. 结论建立了一种同时筛选第一、二和三类整合子的方法,实际检测显示其可行性,为全面细致研究整合子介导的细菌耐药提供了一种快速、简便的方法.