Amplification d'acides nucleiques cibles par la reaction de la ligase comblant des espaces vides

Un mode de realisation de "remplissage d'espaces vides" ameliore, de la reaction en chaine de la ligase (RCL) est decrit. Le remplissage d'espaces vides par RCL se fait au moyen d'une RCL dans laquelle au moins une des sondes est pourvue d'un evidement de sorte qu'un espace vide soit forme entre les sondes adjacentes lorsqu'elles sont hybridees en la cible. L'espace vide est comble a l'aide d'une polymerase et des triphosphates de desoxyribonucleotides avant la liaison des sondes. Il y a des versions a simple et a double espaces vides selon qu'une ou les deux sondes sont pourvues d'un evidement et necessitent le remplissage avant la liaison. L'amelioration reside dans la selection et l'utilisation de sequences cibles de sorte que seulement un type ou deux types de triphosphates de desoxyribonucleotides sont necessaires pour remplir les doubles espaces vides, chacun ayant une longueur de 1-10 bases, de preference 1-3 bases. Des sondes ayant des sequences specifiques sont revendiquees pour un certain nombre d'agents pathogenes.