043 Contribution de la protéine SC35 aux fonctions prolifératives du facteur de transcription E2F1 au cours de la carcinogénèse pulmonaire

Introduction : Le facteur de transcription E2F1 joue un role crucial dans la progression du cycle cellulaire, notamment lors de la transition G1/S. Nous avons recemment identifie le facteur d’epissage SC35 comme une nouvelle cible transcriptionnelle de E2F1. Nous emettons aujourd’hui l’hypothese selon laquelle la proteine SC35 pourrait contribuer aux fonctions proliferatives de E2F1, en particulier dans les tumeurs neuroendocrines pulmonaires de haut grade qui surexpriment E2F1. Methodes : Nous avons realise des experiences de synchronisation cellulaire et detecte la proteine SC35 et son transcrit par western blot et RT-PCR. Nous avons analyse l’effet de la neutralisation de l’expression de SC35 par ARNi sur le cycle cellulaire dans un modele cellulaire derive d’une tumeur neuroendocrine pulmonaire, en etudiant l’expression de certains acteurs cles de la transition G1/ S par western blot et RT-PCR. Nous avons recherche une interaction entre les proteines E2F1 et SC35 par des experiences d’immunoprecipitation et de GST-pull down. Nous avons etudie l’effet de SC35 sur l’activite transcriptionnelle de E2F1 par des tests d’activite luciferase. Nous avons analyse l’expression de la proteine SC35 dans des tumeurs pulmonaires neuroendocrines par western blot et RT-PCR. Resultats : Nous mettons en evidence une variation de l’expression de la proteine SC35 et de son transcrit au cours du cycle cellulaire, avec un pic lors de la transition G1/S. De plus, nous montrons que la neutralisation de SC35 affecte l’expression de proteines impliquees dans la synthese d’ADN et de certaines cyclines, et induit une diminution du nombre de cellules en phase S. D’un point de vue moleculaire, nous montrons que la proteine SC35 interagit directement avec E2F1 et stimule son activite transactivatrice sur plusieurs de ses promoteurs cibles. Enfin, nous observons une surexpression de la proteine SC35 dans les tumeurs neuroendocrines pulmonaires comparativement aux tissus normaux associes. Conclusions : Ces donnees suggerent un role du facteur d’epissage SC35 dans les fonctions proliferatives de E2F1 au cours de la transition G1/S du cycle cellulaire. Ainsi, la deregulation conjointe des deux proteines dans les tumeurs neuroendocrines pulmonaires pourrait contribuer a l’agressivite de ces cancers.