MiR-452逆转人乳腺癌MCF-7/DOC细胞对多西他赛耐药性及其机制研究

目的 探讨miR-452在逆转人乳腺癌MCF-7/多西他赛（docetaxel,DOC）细胞对多西他赛耐药的作用机制.方法 应用实时荧光定量PCR法验证对DOC耐药的乳腺癌细胞MCF-7/DOC及其亲本细胞MCF-7中miR-452的表达差异,同时分别检测MCF-7和MCF-7/DOC转染miR-452模拟物和抑制物后的表达变化.用MTT法检测细胞转染后对DOC耐药性的变化,并用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法验证生物信息学预测的miR-452靶基因胰岛素生长因子1受体（insulin-like growth factor-1 receptor,IGF-1R）,以探讨其可能的作用机制.结果 MCF-7/DOC细胞中miR-452的相对表达量显著高于其亲本细胞MCF-7的表达量（78.86±21.89）倍,t=3.88,P=0.02;MCF-7转染miR-452模拟物后,miR-452相对表达量高于其阴性对照组（212.15±50.08）倍,t=11.13,P＜0.01;耐药性实验组为（1.98±0.11） μmol/L,高于阴性对照组的（0.85±0.08） μmol/L,P＜0.01;IGF-1R的mRNA和蛋白质水平低于其阴性对照组,mRNA水平为（0.54±0.22）倍,t=2.90,P=0.04.相反,MCF-7/DOC转染miR-452抑制物后,miR-452相对表达量低于其阴性对照组（0.58±0.07）倍,t=8.00,P=0.02;耐药性实验组为（44.45±3.20）μmol/L,低于阴性对照组的（107.31±6.63） μmol/L,P＜0.01;IGF-1R的mRNA和蛋白质水平高于其阴性对照组,mRNA水平为（50.90±4.16）倍,t=53.76,P＜0.01.结论 miR-452可能通过靶基因IGF-1R改变DOC的耐药性.