Ciblage de MYC par étude de l'axe LIN28B/let-7 et de l'initiation de la traduction dans le myélome multiple

Le Myelome Multiple (MM) est une hemopathie maligne caracterisee par la proliferation de plasmocytes tumoraux medullaires. MYC occupe un role central dans l'oncogenese du MM car son activation est responsable de la progression du stade precurseur de MGUS en MM symptomatique. Dans ce travail, nous rapportons que l’expression de LIN28B est correlee a celle de MYC et est associee a un mauvais pronostic dans le MM. Nous montrons que l'axe LIN28B/let-7 module l'expression de l’ARNm de MYC, lui-meme cible de let-7. De plus, la perturbation de l'axe LIN28B/let-7 induit une regulation la proliferation des lignees cellulaires de MM in vitro et in vivo. L'analyse par sequencage d’ARN de modeles de KO par utilisation de la technologie CRISPR a montre que l'axe LIN28B/let-7 regule les voies de signalisation de MYC et du cycle cellulaire dans MM. Nous avons de plus etabli une preuve de principe therapeutique de la possibilite de cibler MYC par l’emploi de LNA-GapmeR contenant une sequence analogue a let-7b. Dans un modele de xenogreffe murin, nous montrons que des niveaux eleves d'expression de let-7, par administration de LNA-GapmeR let-7b, repriment la croissance tumorale en regulant l’expression de MYC. Ces resultats revelent un nouveau mecanisme de ciblage therapeutique de MYC via l'axe LIN28B/let-7 dans MM. Nous nous sommes ensuite interesses a evaluer de nouvelles formes de biomarqueurs moleculaires dans le MM par etude des miARN contenus dans les exosomes circulants. Nous avons examine le role pronostique des miARN exosomaux dans une cohorte de 156 echantillons de patients uniformement traites pour un MM au diagnostic. Apres analyse du profil de miARN exosomaux par sequencage de nouvelle generation, nous avons utilise technique de qRT-PCR pour etudier la correlation entre le niveau d’expression de 22 miARN et la survie sans progression (SSP) et la survie globale (SG). Deux miARN, a savoir let-7b et miR-18a, etaient significativement associes a la SSP et SG en analyse univariee, et etaient statistiquement significatifs apres ajustement pour le systeme international de stratification du risque (ISS) et les marqueurs cytogenetique en analyse multivariee. Nos resultats confirment le niveau d’expression des miARN let-7b et miR-18a au sein des exosomes circulants permettent d’ameliorer la stratification du risque chez les patients atteints de MM. Enfin, pour mieux comprendre le programme oncogenique pilote par MYC, nous avons etudie l’efficacite therapeutique d’une librairie de petites sur des lignees cellulaires avec une forte expression de MYC, dans le MM. Les resultats ont permis d’identifier les rocaglates, une famille de composes inhibant l’initiation de la traduction, comme etant les plus actifs. L’etude du profil transcriptionnel par sequencage de l’ARN de lignees cellulaires de MM traitees par CMLD010509 ou DMSO a revele l’activation d’un programme de transcription et l’inhibition d’un programme traductionnel, caracteristique de l’inactivation de HSF1 secondaire a l’inhibition de la traduction. Le profile traductionnel etait etudie par spectrometrie de masse quantitative, permettant d’identifier un ensemble de proteines, tels que MYC, MDM2, CCND1, MAF et MCL-1, specifiquement affectees par l’inhibition de la traduction liee au compose CMLD010509 dans le MM. Nous avons confirme l’efficacite therapeutique des rocaglates dans plusieurs modeles murins de MM. Ces resultats demontrent la possibilite de cibler le programme de traduction oncogenique lie a MYC dans MM.