Propriétés oncogéniques des facteurs de transcription STAT5

Les etudes chez la souris ont montre que les facteurs de transcription STAT5 sont necessaires a la proliferation et /ou a la survie des cellules hematopoietiques. Ces proteines jouent un role important dans les proprietes transformantes de certaines oncoproteines telles que Bcr-Abl, Tel-Abl et Tel-Jak2 et sont souvent constitutivement activees dans les cellules de tumeurs solides ou de patients leucemiques. Leur implication directe dans la genese de leucemie a ete demontree par l’utilisation de formes mutees constitutivement actives de STAT5 (cS5F et STAT51*6). Afin de comprendre les mecanismes moleculaires mis en jeu dans l’activite oncogenique de STAT5, nous avons etudie les proprietes transformantes de cS5F dans les cellules primaires de moelle osseuse de souris ainsi que dans la lignee cellulaire Ba/F3. L’expression de cS5F dans les cellules de moelle osseuse de souris conduit, en effet, a l’induction d’une leucemie multi-lineage apres transplantation de ces cellules dans des souris receveuses et rend les cellules Ba/F3 independantes de l’IL-3 pour leur proliferation. Nos resultats montrent aussi bien dans les cellules primaires leucemiques que dans les cellules Ba/F3 que cS5F induit l’activation d’Akt un effecteur crucial de la voie PI 3-kinase. Cette activation passe par une interaction entre la sous-unite regulatrice de la PI 3-kinase, p85 et la molecule adaptatrice Gab2. L’utilisation de formes mutees de Gab2 ou d’Akt et d’un inhibiteur pharmacologique de la PI 3-kinase montre que l’activation de la voie Gab2/PI 3-kinase/Akt joue probablement un role essentiel dans les proprietes leucemogenes de cS5F. Les resultats des etudes immuno-cytochimiques et de Western blot sur des extraits nucleaires et cytoplasmiques avec un anticorps anti-P-Y-Stat5 montrent que cS5F est majoritairement localise dans le cytoplasme des cellules leucemiques, soutenant donc nos observations d’un role actif de cette proteine oncogenique dans ce compartiment cellulaire. Des resultats similaires ont ete obtenus sur des cellules et de biopsies medullaires de patients leucemiques (LMC, LAM et mastocytoses), montrant ainsi que cette localisation inhabituelle des formes actives de STAT5 n’est pas liee a une propriete specifique de cS5F. La presence de formes phosphorylees de STAT5 dans les mastocytoses nous a conduit a etudier le role de STAT5 dans la signalisation de c-Kit, le recepteur au Stem Cell Factor (SCF). Nos resultats montrent que l’activation de STAT5, aussi bien dans les cellules de moelle osseuse transformees par cS5F que dans des progeniteurs hematopoietique humains, joue un role important le developpement des mastocytes in vitro en presence de SCF et que son activation constitutive contribue a un developpement anormal des mastocytes in vivo. L’ensemble de nos donnees suggere que l’activation constitutive de STAT5 pourrait promouvoir une localisation et une activite cytoplasmique susceptible d’etre relie a l’activation d’autres voies de signalisation comme la voie PI3-K et que l’inhibition simultanee de l’activite de STAT5 (cytoplasmique et nucleaire) et de la PI 3-kinase pourrait ouvrir des perspectives therapeutiques interessantes dans le traitement d’hemopathies associees a l’activation de ces deux voies de signalisation.