miR-181b过表达对胶质瘤U87细胞中MT1-MMP和TIMP3蛋白表达和细胞侵袭能力的影响

目的：探讨微小RNA-181b（miR-181b）过表达对人胶质瘤细胞中膜型基质金属蛋白酶1（MT1-MMP）和金属蛋白酶组织抑制剂3（TIMP3）表达的调控作用及对细胞侵袭能力的影响。方法：将培养于DMEM培养基的人胶质瘤U87细胞分为阴性对照组（不做任何处理）、空载组（转染Lipofetamine 2000）、乱序组（转染乱序has-miR-181b寡核苷酸）和miR-181b组（转染has-miR-181b寡核苷酸）。qRT-PCR法检测各组细胞中miR-181b基因表达水平,Western blotting法检测各组细胞中MT1-MMP和TIMP3蛋白的相对表达水平,基质胶侵袭试验检测各组细胞的侵袭能力,测定各组细胞的趋化运动抑制率、迁移率和细胞黏附率;生物信息学数据库预测miR-181b的侯选靶基因。结果：miR-181b组U87细胞中miR-181b基因表达水平明显高于其他各组（P〈0.01）,呈过表达。miR-181b组U87细胞中MT1-MMP蛋白表达水平低于其他各组（P〈0.01）,miR-181b与MT1-MMP蛋白表达水平呈负相关关系（r=-0.787,P〈0.05）;miR-181b组U87细胞中TIMP3蛋白表达水平高于其他各组（P〈0.01）,miR-181b与TIMP3蛋白表达水平呈正相关关系（r=0.801,P〈0.05）。基质胶侵袭试验中miR-181b组穿膜细胞数明显低于其他各组（P〈0.05）。与其他3组比较,miR-181b组U87细胞的趋化运动抑制率升高、迁移率和细胞黏附率降低（P〈0.05）。生物信息学数据库预测,在MT1-MMP的3′非翻译区（3′UTR）有1个与miR-181b的结合位点,在TIMP3的3′UTR有2个与miR-181b的结合位点。结论：miR-181b过表达可下调MT1-MMP和上调TIMP3蛋白的表达,从而抑制胶质瘤细胞的侵袭能力;miR-181b作为关键性调节miR,可能成为胶质瘤治疗的重要靶标。