Lg-1诱导人胃癌细胞系BGC-823凋亡作用及机制的探讨

目的：研究新鬼臼毒素衍生物4β-4-脱氧-氯取代的异亮氨酸（5-FU基）-戊醇酯-4’-去甲表鬼臼（Lg-1）对人胃癌细胞系BGC-823的诱导凋亡作用及机制。方法：噻唑蓝（MTT）、流式细胞术和Hoechs33258染色分别检测Lg-1对BGC823细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。荧光定量RTPCR（qRT-PCR）检测药物处理后对BGC-823细胞凋亡相关基因p53、Bax、Bcl-2、p21和Caspase-3表达的影响。结果：Lg-1对BGC-823细胞增殖具有明显剂量和时间依赖的抑制作用．随药物浓度增加，抑制效应增强，药物浓度为0．01、0．1、1和10μmol／L时，Lg-1对BGC-823的抑制率分别为23．5％、30．8％、32．4％和52．1％，与依托泊苷（Vp-16）处理组（3．5％、8．7％、10．9％和21．3％）比较差异有统计学意义，P均〈0．01。随时间延长，抑制作用逐渐增强，12-60hLg-1处理组对BGC-823的抑制率与Vp-16处理组比较差异有统计学意义，12h抑制率分别为9．8％和8．0％，P=0．001；24h分别为11．6％和9．0％，P=0．02；36h分别为19．4％和16．2％．P=0．014；48h分别为44．1％和41．2％，P=0．048；60h分别为65．4％和50．1％，P=0．001。细胞周期检测显示，Lg-1作用12和24h后，G2／M期的细胞含量分别为39．37％和74．36％，与对照组及Vp-16组比较均明显增加，而G0／G1期细胞含量分别为20．06％和12．25％，较对照组及Vp16组显著减少。Hoechst33258染色显示，Lg-1处理组细胞核固缩、碎裂、凋亡样改变．药物处理后Bcl-2mRNA的表达呈降低趋势，Vp-16处理组Bcl-2mRNA表达量为0．748，Lg-l处理组为0．425，而p53、Bax、p21和Caspase-3mRNA的表达呈增高趋势．Vp-16处理组mRNA表达量分别为1．074、1．232、1．818和2．9，Lg-1处理组分别为1．903、1．393、1．911和3．097，且Lg-l处理组作用优于Vp-16处理组。结论：Lg-1可抑制胃癌细胞增殖，使细胞阻滞在G2／M期，该过程可能与其上