GST-IL-21融合蛋白在大肠杆菌中的表达及其活性测定

目的：克隆人白细胞介素21（IL-21）编码区的cDNA,在大肠杆菌中得以表达,并检测其促进人外周血单核细胞（PBMC）增殖的生物学活性.方法：利用基因工程技术,以植物血凝素（PHA）刺激的人扁桃体细胞cDNA文库为模板,经PCR扩增获得IL-21的编码基因,并将其重组于表达载体pGEX4T-2中,转化大肠杆菌DH5α进行诱导表达,纯化得到GST-IL-21重组融合蛋白;MTI法检测其对促进PBMC增殖的功能.结果：获得了IL-21编码区的cDNA克隆;SDS-PAGE显示经IPTG诱导表达的该融合蛋白相对分子质量为41 000;纯化后的GST-IL-21融合蛋白在体外具有显著的促进PBMC增殖的作用.结论：GST-IL-21融合蛋白在原核表达系统中可以有效表达,并具有较好的生物学活性.