RUSSULA DELICA FR.’NİN SİTOTOKSİTE, APOPTİK VE NEKROTİK ETKİLERİ

Russula delica Fr.’nin sitotoksite, apoptik ve nekrotik etkileri incelenmistir. Kuru basidiokarplardan alinan parcalar malt ekstrakt agarda doku kulturu yontemiyle gelistirildi. Sirasiyla primer ve sekonder miseller 27°C’de, karanlikta, 10 gun sureyle inkube edildi. Sekonder misellerden 3’er pelet nutrientbroth’da 27°C’de, 140 rpm’de 7 gunde gelisimini tamamladi. Numuneler soxlet cihazinda 80°C, %70’lik etil alkolde 1 saat ekstraksiyon edilerek sitotoksite, apoptik ve nekrotik calismalar icin hazirlandi. Sitotoksite calismalarinda, ekstrakt MCF-7 ve L929 Fibroblast hucrelere ornek konsantrasyonlari 5mg/ml, 2,5mg/ml, 1.25mg/ml, 0.625mg/ml, 0.315mg/ml olarak uygulandi. WST-1 solusyonu eklenerek inkubasyon sonucunda 440nm dalga boyunda mikroplate okuyucuda absorbans olcumu yapildi. Ikili boyama deneyi ile ayni hucre hattinda apoptoz ve nekroz belirlendi. Ikili boyama solusyonu hazirlanarak MCF-7 ve L929 Fibroblast hucrelere ayni konsantrasyonlarda uygulandi. Inkubasyon sonucunda florasanatacmanli mikroskop FITC ve DAPI filtresinde 20X buyutmede olcum yapildi. Toksite, konsantrasyonlara bagli olarak degismektedir. 5mg/ml de hazirlanan ornekte toksite orani yuksektir. 2.5mg/ml altinda hazirlanan miktarlar arasinda bir fark yoktur. Ayrica kanser ve normal hucrelerin canlilik degerleri arasinda anlamli bir fark gozlemlenmemistir. Orneklerde herhangi bir apoptik ve nekrotik etki gozlemlenmemistir .