Sequen age en phase solide

L'invention porte sur des procedes de sequencage d'un acide nucleique present dans un echantillon utilisant comme substrat des polymerases d'acides nucleiques marques par des phosphates terminaux. Lesdits procedes utilisent a cet effet un nucleoside polyphosphate, un didesoxynucleoside polyphosphate, ou un analogue de didesoxynucleoside polyphosphate comportant un fragment de colorant colorimetrique, chimioluminescent, ou fluorescent, un marqueur massif ou un marqueur electrochimique fixe a l'un des phosphates terminaux. Quand une polymerase d'acide nucleique utilise cet analogue comme substrat, un marqueur activable par des enzymes doit etre present sur le produit secondaire de polyphosphate mineral resultant du transfert du phosphoryle. Le clivage dudit polyphosphate par l'intermediaire de la phosphatase induit une modification detectable du marqueur lui etant attache. Dans certains cas, on peut detecter directement le polyphosphate par l'intermediaire du marqueur et obtenir une information sur la nature de l'acide nucleique. Quant l'essai de la polymerase a lieu en presence d'une phosphatase, on dispose d'un moyen de suivi en temps reel de la synthese de l'ADN et de l'ARN et de caracterisation d'un acide nucleique cible.