Diseño y evaluación de nuevas técnicas de diagnóstico serológico y molecular para el diagnóstico de las infecciones de transmisión sexual

El terme infeccions de transmissio sexual (ITS) inclou una serie de sindromes causats per agents patogens que poden ser adquirits mitjancant l'activitat sexual am un augment de la seva als ultims anys. Sota el concepte d'ITS s'agrupen tant les malalties veneries classiques (uretritis, sifilis, chancroide i limfogranuloma veneri) i aquelles en que la via sexual no es l'unic (hepatitis B i C, l'amebiasis intestinal en HSH, la infeccio per virus de la immunodeficiencia humana (VIH) i algunes parasitosis). Els patogens mes importants engloben Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Treponema pallidum, Trichomonas vaginalis, VIH i altres microorganismes emergents com el Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum i Ureaplasma parvum. El correcte diagnostic de les ITS te importancia tant com a problema de salut publica com per les complicacions que poden produir en aquells pacients no diagnosticats. A la practica clinica moltes vegades les ITS son diagnosticades sindromicament be per no disposar de proves sensibles, be per la manca en alguns laboratoris d'aquestes eines. La Tesi te 3 objectius principals que s'han abordat en tres articles diferents. El primer objectiu es l'avaluacio d'una tecnica de avidesa per a la identificacio d'infeccio recent pel VIH 1 utilitzant un immunoassaig automatitzat de quimioluminiscencia (QLIA). RITA de l'angles Recent Infection Testing Algorithm es un nom generic per a una serie de tecniques de laboratori que distingeixen la infeccio recent pel VIH. L'estudi indica que l'assaig d'avidesa avaluat es un metode fiable per identificar infeccions recents per VIH-1 i podria ser utilitzat dins un algoritme RITA per estimar la incidencia d'infeccio per VIH-1 en la poblacio. El segon objectiu de la Tesi va ser descriure la utilitat d'una tecnica automatitzada Vitros Syphilis TPA (assaig treponemic per QLIA) per fer el diagnostic de la sifilis comparant-lo amb tecniques de enzimoimmunoanalisi, aixi com a primer pas de el nou algoritme revers de la sifilis en relacio a les proves classiques, Rapid Plasma Reagin (RPR) i Treponema Pallidum hemagglutination assay (TPHA). Aquesta tecnica permet actuar com a tecnica de cribratge en laboratoris amb alta carrega de treball gracies al seu alt valor predictiu negatiu. Per completar l'estudi de les ITS, el tercer objectiu de la Tesi va ser estudiar i avaluar una nova tecnica de biologia molecular mitjancant PCR multiplex, a partir de diferents tipus de mostres provinents de poblacions seleccionades i estudiades previament per altres tecniques. Aquest metode permetria detectar a partir d'una sola mostra, set diferents agents causals d'ITS (Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Trichomonas vaginalis, Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum, Mycoplasma hominis i Mycoplasma genitalium). Les dades obtingudes de sensibilitat, especificitat i valors predictius al comparar-los amb les tecniques convencionals utilitzades en el nostre laboratori van ser molt bons, permetent per tant, l'adopcio d'aquests metodes com a tecnica per al diagnostic de les MTS. Un altre punt fort va ser la possibilitat de deteccio de Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum, Mycoplasma hominis i Mycoplasma genitalium. La seva controvertida deteccio, sobretot dels tres primers, encara avui, presenta algunes ombres que esperem poder aclarir a mesura que anem coneixent. Les noves tecniques moleculars i immunologiques avaluades en aquesta Tesi han resultat utils per a la deteccio d'agents causals d'ITS. En general, els assajos de PCR son molt sensibles i especifics en comparacio amb altres tecniques com els cultius. D'altra banda, la introduccio d'estrategies basades en PCR multiples permetria identificar pacients amb coinfeccions i tambe explicar errors en tractaments.