EFEITO DA QUIMIOTERAPIA EM MODELO DE ESFEROIDES (3D)

A investigacao pre-clinica do fenotipo do câncer, agressividade e resistencia aos antineoplasicos e geralmente realizada em modelos in vitro de cultura de celulas tumorais em duas dimensoes. Porem, esse modelo apresenta limitacoes, como baixa interacao celular com a matriz extracelular e entre celulas de diferentes linhagens e nao equivalencia de efeito de antineoplasicos com modelos in vivo . Assim, os modelos de cultura 3D foram desenvolvidos para promover melhor simulacao das condicoes in vivo de interacoes celulares e expressoes fenotipicas. Assim, os objetivos deste estudo foram desenvolver um modelo de cultura 3D (esferoides) para as linhagens celulares de carcinoma de pulmao de nao-pequenas celulas NCI-H460 e de carcinoma colorretal HT-29 e avaliar o efeito da quimioterapia neste modelo. Primeiramente foram realizados testes para padronizar o protocolo de cultivo 3D. A seguir a linhagem NCI-H460 foi exposta ao tratamento com cisplatina e a linhagem HT-29 ao quimioterapico 5-Fluorouracil. A analise foi realizada por mensuracao do diâmetro dos esferoides antes do tratamento, 48 h apos o tratamento e depois a cada 3 dias, ate os esferoides se desintegrarem. Observamos que: a densidade ideal a ser utilizada para este e 10x10 4 celulas; o tempo para a formacao dos esferoides e entre 5 e 7 dias; a durabilidade dos esferoides e de 15 a 17 dias; os esferoides nao tratados apresentaram um aumento significativo de diâmetro em relacao aos tratados. Com isso, concluimos que o metodo de formacao de esferoides proposto por esse trabalho permite o uso das linhagens NCI-H460 e HT-29 para estudos in vitro a fim de contribuir para o conhecimento em relacao a biologia do tumor e eficacia de antineoplasicos.