Caractérisation enzymatique de la protéine FadD32 de M.tuberculosis, impliquée dans la biosynthèse des acides mycoliques et cible potentielle d'antituberculeux, ainsi que d'autres enzymes paralogues

La recrudescence de la tuberculose, favorisee par l'epidemie de VIH et associee a l'apparition de souches resistantes aux antibiotiques, souligne la necessite de determiner les mecanismes moleculaires de sa pathogenicite et de developper de nouveaux antibiotiques. Le genome de Mycobacterium tuberculosis, l'agent etiologique de la tuberculose recele un grand nombre de genes impliques dans le metabolisme lipidique, dont les genes fadD qui codent pour des acyl-CoA synthetase putatives. Nous avons realise la caracterisation enzymatique de proteines FadD impliquees dans la biosynthese des constituants de l'enveloppe du bacille tuberculeux, et plus particulierement dans celle des acides mycoliques. Ces acides gras a longues chaines, alpha-ramifies et beta-hydroxyles sont des composes majeurs et specifiques de l'enveloppe des Corynebacterinae. Ils sont essentiels a la survie des mycobacteries. Ainsi, les enzymes intervenant dans la voie de biosynthese des acides representent des cibles potentielles d'antituberculeux. Parmi ces proteines, l'enzyme FadD32, impliquee dans l'etape cle de condensation "mycolique" entre deux acides gras, est essentielle a la croissance des mycobacteries. La caracterisation enzymatique de FadD32 a permis de mettre en evidence son activite acyl-ACP Ligase et le mecanisme reactionnel particulier de l'etape de condensation avec sa proteine partenaire la condensase Pks13. Un inhibiteur, analogue de substrat, de FadD32 a ete teste avec succes sur l'enzyme, mais egalement sur la biosynthese mycolique et la croissance bacterienne. Nous avons developpe un essai enzymatique de FadD32 adaptable au criblage a haut debit. Cet essai servira in fine, a tester la chimiotheque d'inhibiteurs d'un partenaire industriel.