坝上长尾鸡 MITF 基因核心启动子鉴定与分析

旨在探明坝上长尾鸡小眼畸形相关转录因子（microphthalmia-associated transcription factor， MITF ）基因启动子活性区与结构，为研究 MITF 基因在毛囊组织中的表达调控提供依据。本研究采用双荧光素酶表达载体的方法，构建了6个含有不同长度坝上长尾鸡 MITF 基因启动子片段的pGL3-Basic表达载体及4个核心启动子区突变载体，转染DF1细胞48 h后检测双荧光素酶活性。结果，确定了鸡 MITF 基因启动子的核心区域为-660~+200 bp。其中突变位点-579 bp、-505 bp、-274 bp、-220 bp、-203~-202 bp、-98 bp、-46 bp、-14 bp、+1 bp、+28 bp对 MITF 基因启动子活性有较大影响，在突变区域预测到HOX家族（HOXA3、HOXD8、HOXD9、HOXD10、HOX11）、NF-1、DBP、TFⅡD和TFⅡB与 MITF 序列的结合性发生了变化。