Etude structurale et fonctionnelle des antigènes PfEMP1 et AMA1 de Plasmodium

Le paludisme est une maladie infectieuse qui reste associee a une mortalite elevee. L'agent infectieux responsable est le parasite Plasmodium. Notre interet s'est porte sur la proteine PfEMP1 codee par le gene var O. L'expression heterologue des differents domaines de PfEMP1 var O, qui represente une difficulte majeure dans l'etude de ce type de proteine, a ete etudiee dans les systemes E. Coli et baculovirus. Les domaines recombinants var O NTS-DBL1α1 et DBL2b-C2 ont ete produits dans les deux systemes sous forme soluble. L'etude de ces proteines par proteolyse menagee et dichroisme circulaire a montre que chaque proteine etait repliee de maniere equivalente dans les deux systemes d'expression. Les anticorps monoclonaux obtenus chez la souris contre ces domaines recombinants reconnaissent la surface des globules rouges infectes exprimant le variant O. D'autre part, les anticorps polyclonaux murins diriges contre le domaine NTS-DBL1α1 bacterien et baculovirus inhibent la formation des rosettes du variant O. Nous avons egalement poursuivi une etude structurale sur la proteine AMA1 de P. Vivax, dont la structure cristalline a ete recemment resolue au laboratoire, afin d'analyser l'antigenicite de cette proteine. Nous avons determine par cristallographie des rayons , la structure d'un complexe entre l'antigene PvAMA1 et le fragment Fab de l'anticorps monoclonal murin F8. 12. 19, qui montre une reactivite croisee sur d'autres especes Plasmodium, ainsi qu'un second complexe entre le Fab F8. 12. 19 et l'antigene AMA1 de P. Falciparum. La structure de ces deux complexes montre que l'anticorps s'adapte aux deux antigenes homologues malgre les differences en acides amines.