EFEITO DA INFECÇÃO DE METARHIZIUM ANISOPLIAE SOBRE A ATIVIDADE PROTEOLÍTICA PRESENTE EM INTESTINO DE RHIPICEPHALUS MICROPLUS

Este trabalho pretende contribuir para o estudo de formas alternativas de controle de Rhipicephalus microplus atraves do fungo Metarhizium anisopliae . Com o objetivo de avaliar o efeito deste fungo sobre a atividade de proteases do carrapato bovino, 80 femeas ingurgitadas de R. microplus foram divididas em grupo controle e grupo de tratamento (48h de tratamento). As femeas tratadas foram imersas nas suspensoes conidiais e os controles em agua destilada esteril acrescida de Tween 80 0,1%. Foi feita a disseccao das femeas e os intestinos foram lavados, secos em papel de filtro para a retirada do excesso de liquidos e pesados. Foram  entao homogeneizados e a concentracao proteica foi determinada. A presenca da atividade proteolitica em extrato intestinal foi dosada pela hidrolise do substrato proteico hemoglobina e pela quantificacao da tirosina. Nos valores de pH 4,0 e 5,0 foi encontrado um aumento da atividade frente o uso do fungo. Nestes valores de pH ha presenca principalmente de cisteino e aspartico protease. Ao fazer uso de um inibidor de cisteino protease (ditiotreitol) houve inibicao de 74% e 54% da atividade proteolitica nos grupos tratado e controle, respectivamente. Enquanto isso, o outro inibidor de cisteino proteases, phenylmethanesulfonyl fluoride, inibiu 86% e 80% da atividade proteolitica em grupos tratado e controle, respectivamente. Foi possivel concluir com este estudo que ha uma atividade majoritaria de cisteino proteases atuando em intestino de R. microplus e que esta atividade pode ser aumentada na presenca do fungo entomopatogenico. Este aumento, por sua vez, pode ser decorrente de proteases do fungo ou do mecanismo de defesa do carrapato, o que sugere que M. anisopliae pode vir a ser uma forma de controle eficaz para este carrapato.