Análise da expressão de miR-10b e miR-7 potencialmente associados à expressão de BRCA1 em carcinomas de mama

Introducao: O câncer de mama e a neoplasia mais frequente entre as mulheres de todo o mundo e representa a principal causa de morte nesta populacao. Importantes biomarcadores tem sido estudados, a fim de definir melhor o prognostico de pacientes acometidas por esta doenca. Os microRNAs sao pequenas moleculas de RNAs nao codificantes, compostos por 21 a 25 nucleotideos e desempenham importante papel na regulacao pos-transcricional de diversos genes. Objetivo: O objetivo do estudo foi avaliar a expressao de microRNAs (miRNAs: hsa-miR-7 e hsamiR- 10b) e da proteina BRCA1 em amostras de câncer de mama, bem como as possiveis associacoes entre a expressao desses marcadores e os aspectos clinicopatologicos e prognosticos. Metodo: O estudo foi composto por 92 casos de carcinoma de mama, provenientes do Hospital Araujo Jorge, da Associacao de Combate ao Câncer em Goias. Foram utilizados fragmentos de tumores incluidos em parafina. A extracao de microRNA das amostras foi realizada e o produto gerado foi utilizado para a sintese de cDNA. As amostras de cDNA foram ajustadas para igual concentracao e submetidas a PCR quantitativa em tempo real (qRT-PCR). As amostras foram avaliadas ainda por meio de imuno-histoquimica para expressao de BRCA1. Resultados: Um total de 234 registros de imuno-histoquimica foi avaliado, resultando em 56 casos de carcinomas de mama apresentando fenotipo nao triplonegativo e 36 com fenotipo triplo-negativo. A sobrevida das pacientes em funcao das caracteristicas clinicopatologicas demonstrou associacoes com os casos triplonegativos (p=0,044), estadios mais avancados (p=0,005), acometimento linfonodal (p=0,038), presenca de metastase a distância (p=0,0008) e ausencia da expressao de BRCA1 (p=0,039). Associacoes significativas foram demonstradas entre a ausencia de BRCA1 e o fenotipo triplo-negativo (p=0,0346), entre a ausencia da expressao do receptor de estrogeno e ausencia da expressao de BRCA1 (p=0,006), e entre o receptor de progesterona e a ausencia da expressao de BRCA1 (p=0,0163). A analise por qRT-PCR demonstrou diferentes niveis de expressao de miR-10b e de miR-7, com associacoes significativas ao fenotipo triplo-negativo (p=0,021; p=0,042) e a ausencia de BRCA1 (p=0,039; p=0,006). A comparacao entre ausencia e presenca da expressao do receptor do fator de crescimento epidermico humano demonstrou diferenca significativa para miR-7 (p=0,031), sendo que a expressao de miR-10b nestes casos nao foi estatisticamente diferente (p=0,926). Conclusao: Associacoes significativas foram demonstradas entre a ausencia de BRCA1 e o fenotipo triplo-negativo. A sobrevida em cinco anos foi inversamente associada ao fenotipo triplo-negativo, aos estadios clinicos III e IV, a presenca de metastase linfonodal, a presenca de metastase a distância e a ausencia da expressao de BRCA1. Este estudo demonstrou ainda que hsa-miR-7 e hsa-miR- 10b estao significativamente associados a ausencia da expressao de BRCA1 e ao fenotipo triplo-negativo, sendo observada pior sobrevida nestes perfis de pacientes. Estudos com maior numero de casos e com linhagens celulares devem ser realizados para constatar o papel de hsa-miR-7 e hsa-miR-10b na modulacao da expressao de BRCA1.